华南理工大学学报(自然科学版)
華南理工大學學報(自然科學版)
화남리공대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF SOUTH CHINA UNIVERSITY OF TECHNOLOGY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2005年
1期
79-83
,共5页
熊盛%谢秋玲%王一飞%邓宁%粟宽源
熊盛%謝鞦玲%王一飛%鄧寧%粟寬源
웅성%사추령%왕일비%산저%속관원
乙肝表面抗原%单链抗体%巴氏毕赤酵母%发酵%纯化
乙肝錶麵抗原%單鏈抗體%巴氏畢赤酵母%髮酵%純化
을간표면항원%단련항체%파씨필적효모%발효%순화
中试规模生产可溶性重组人抗HBsAg单链抗体(HBscFv),分泌表达HBscFv的巴氏毕赤酵母(P. pastoris)工程菌在30L发酵罐中进行补料分批培养.上清中的HBscFv以离子交换及免疫亲和层析两步法进行纯化.发现酵母工程菌经7 d补料分批培养后,600 nm波长下的光密度值(OD600)达到334,目的蛋白表达量为260mg/L.纯化后,可获得纯度为95%的HBscFv,产量为171 mg/L.活性测定结果表明,HBscFv制品的比活性为(2.52±0.17)μg-1,与大肠杆菌来源的HBscFv无明显差异.
中試規模生產可溶性重組人抗HBsAg單鏈抗體(HBscFv),分泌錶達HBscFv的巴氏畢赤酵母(P. pastoris)工程菌在30L髮酵罐中進行補料分批培養.上清中的HBscFv以離子交換及免疫親和層析兩步法進行純化.髮現酵母工程菌經7 d補料分批培養後,600 nm波長下的光密度值(OD600)達到334,目的蛋白錶達量為260mg/L.純化後,可穫得純度為95%的HBscFv,產量為171 mg/L.活性測定結果錶明,HBscFv製品的比活性為(2.52±0.17)μg-1,與大腸桿菌來源的HBscFv無明顯差異.
중시규모생산가용성중조인항HBsAg단련항체(HBscFv),분비표체HBscFv적파씨필적효모(P. pastoris)공정균재30L발효관중진행보료분비배양.상청중적HBscFv이리자교환급면역친화층석량보법진행순화.발현효모공정균경7 d보료분비배양후,600 nm파장하적광밀도치(OD600)체도334,목적단백표체량위260mg/L.순화후,가획득순도위95%적HBscFv,산량위171 mg/L.활성측정결과표명,HBscFv제품적비활성위(2.52±0.17)μg-1,여대장간균래원적HBscFv무명현차이.