CAJ | 학술논문

目的:探讨玉竹提取物A对小鼠免疫性肝损伤的保护作用,探讨其发挥此作用的可能的机制.方法:①实验于2004-06/10在锦州医学院免疫实验室完成.选用健康雄性昆明小鼠50只,普通级.将50只健康雄性昆明小鼠随机分为5组:正常对照组、模型对照组、玉竹提取物A 0.5 g/kg组、玉竹提取物A1 g/kg组、玉竹提取物A 2g/kg组,每组10只.②玉竹提取物A是玉竹的干燥根茎经水醇法提取而得.③正常对照组和模型对照组小鼠腹腔注射生理盐水,玉竹提取物A0.5,1,2g/kg组小鼠分别腹腔注射相应浓度的玉竹提取物A,每次每只0.5 mL,3次/d,连续注射4 d.最后一次注射后8 h,除正常对照组注射生理盐水外,其余各组均尾静脉注射20 mg/kg的刀豆蛋白A 0.5 mL,制备免疫性肝损伤模型.④注射刀豆蛋白A 8 h后摘眼球取血低温保存,取肝待行光镜检查,以观察肝脏组织病理学改变(常规苏木精-伊红染色),取脾待行淋巴细胞增殖实验(采用四甲基偶氮唑盐法)和流式细胞术以检测T淋巴细胞亚群.各组小鼠血清谷丙转氨酶活性检测按购自南京建成生物研究所的谷丙转氨酶试剂盒说明进行.⑤组间计量资料差异比较采用方差分析.结果:昆明小鼠50只均进入结果分析.①肝脏组织病理学改变:模型对照组可见明显免疫性肝损伤病理改变.玉竹提取物A 3个实验组小鼠肝损伤病理改变均不同程度的好于模型对照组.②玉竹提取物A对血清谷丙转氨酶活性的影响:模型对照组血清谷丙转氨酶活性明显高于正常对照组(t=13.8,P<0.01),玉竹提取物A 3个实验组血清谷丙转氨酶活性低于模型对照组,尤以玉竹提取物A 2 g/kg组与模型对照组差异最明显(t=5.62,P<0.01),且存在剂量依赖关系.③玉竹提取物A对T淋巴细胞转化增值的影响:刀豆蛋白A刺激体外培养的各组脾淋巴细胞,模型对照组的刺激指数明显高于正常对照组(t=9.02,P<0.01),玉竹提取物A 3个实验组的刺激指数明显低于模型对照组(t=6.99～11.06,P<0.01),且存在剂量依赖关系.④玉竹提取物A对脾组织T淋巴细胞亚群的影响:各组,CD4+T,CD8+T淋巴细胞的数量和比例差异不明显(P>0.05).结论:①玉竹提取物A具有抑制肝细胞破坏及改善肝脏微循环的作用.②玉竹提取物A可以显著抑制T淋巴细胞的转化增殖,并呈剂量依赖关系,玉竹提取物A发挥肝保护作用的一个机制可能就是显著抑制T淋巴细胞的转化增殖,减少肝损伤细胞因子的释放,抑制活化增殖的T淋巴细胞对肝细胞的直接细胞毒作用.③在肝损伤的早期可能只是大量免疫细胞聚集于肝脏并且各种分泌及破坏功能增强,而非其数量明显增加. 目的:探討玉竹提取物A對小鼠免疫性肝損傷的保護作用,探討其髮揮此作用的可能的機製.方法:①實驗于2004-06/10在錦州醫學院免疫實驗室完成.選用健康雄性昆明小鼠50隻,普通級.將50隻健康雄性昆明小鼠隨機分為5組:正常對照組、模型對照組、玉竹提取物A 0.5 g/kg組、玉竹提取物A1 g/kg組、玉竹提取物A 2g/kg組,每組10隻.②玉竹提取物A是玉竹的榦燥根莖經水醇法提取而得.③正常對照組和模型對照組小鼠腹腔註射生理鹽水,玉竹提取物A0.5,1,2g/kg組小鼠分彆腹腔註射相應濃度的玉竹提取物A,每次每隻0.5 mL,3次/d,連續註射4 d.最後一次註射後8 h,除正常對照組註射生理鹽水外,其餘各組均尾靜脈註射20 mg/kg的刀豆蛋白A 0.5 mL,製備免疫性肝損傷模型.④註射刀豆蛋白A 8 h後摘眼毬取血低溫保存,取肝待行光鏡檢查,以觀察肝髒組織病理學改變(常規囌木精-伊紅染色),取脾待行淋巴細胞增殖實驗(採用四甲基偶氮唑鹽法)和流式細胞術以檢測T淋巴細胞亞群.各組小鼠血清穀丙轉氨酶活性檢測按購自南京建成生物研究所的穀丙轉氨酶試劑盒說明進行.⑤組間計量資料差異比較採用方差分析.結果:昆明小鼠50隻均進入結果分析.①肝髒組織病理學改變:模型對照組可見明顯免疫性肝損傷病理改變.玉竹提取物A 3箇實驗組小鼠肝損傷病理改變均不同程度的好于模型對照組.②玉竹提取物A對血清穀丙轉氨酶活性的影響:模型對照組血清穀丙轉氨酶活性明顯高于正常對照組(t=13.8,P<0.01),玉竹提取物A 3箇實驗組血清穀丙轉氨酶活性低于模型對照組,尤以玉竹提取物A 2 g/kg組與模型對照組差異最明顯(t=5.62,P<0.01),且存在劑量依賴關繫.③玉竹提取物A對T淋巴細胞轉化增值的影響:刀豆蛋白A刺激體外培養的各組脾淋巴細胞,模型對照組的刺激指數明顯高于正常對照組(t=9.02,P<0.01),玉竹提取物A 3箇實驗組的刺激指數明顯低于模型對照組(t=6.99～11.06,P<0.01),且存在劑量依賴關繫.④玉竹提取物A對脾組織T淋巴細胞亞群的影響:各組,CD4+T,CD8+T淋巴細胞的數量和比例差異不明顯(P>0.05).結論:①玉竹提取物A具有抑製肝細胞破壞及改善肝髒微循環的作用.②玉竹提取物A可以顯著抑製T淋巴細胞的轉化增殖,併呈劑量依賴關繫,玉竹提取物A髮揮肝保護作用的一箇機製可能就是顯著抑製T淋巴細胞的轉化增殖,減少肝損傷細胞因子的釋放,抑製活化增殖的T淋巴細胞對肝細胞的直接細胞毒作用.③在肝損傷的早期可能隻是大量免疫細胞聚集于肝髒併且各種分泌及破壞功能增彊,而非其數量明顯增加.
목적:탐토옥죽제취물A대소서면역성간손상적보호작용,탐토기발휘차작용적가능적궤제.방법:①실험우2004-06/10재금주의학원면역실험실완성.선용건강웅성곤명소서50지,보통급.장50지건강웅성곤명소서수궤분위5조:정상대조조、모형대조조、옥죽제취물A 0.5 g/kg조、옥죽제취물A1 g/kg조、옥죽제취물A 2g/kg조,매조10지.②옥죽제취물A시옥죽적간조근경경수순법제취이득.③정상대조조화모형대조조소서복강주사생리염수,옥죽제취물A0.5,1,2g/kg조소서분별복강주사상응농도적옥죽제취물A,매차매지0.5 mL,3차/d,련속주사4 d.최후일차주사후8 h,제정상대조조주사생리염수외,기여각조균미정맥주사20 mg/kg적도두단백A 0.5 mL,제비면역성간손상모형.④주사도두단백A 8 h후적안구취혈저온보존,취간대행광경검사,이관찰간장조직병이학개변(상규소목정-이홍염색),취비대행림파세포증식실험(채용사갑기우담서염법)화류식세포술이검측T림파세포아군.각조소서혈청곡병전안매활성검측안구자남경건성생물연구소적곡병전안매시제합설명진행.⑤조간계량자료차이비교채용방차분석.결과:곤명소서50지균진입결과분석.①간장조직병이학개변:모형대조조가견명현면역성간손상병리개변.옥죽제취물A 3개실험조소서간손상병리개변균불동정도적호우모형대조조.②옥죽제취물A대혈청곡병전안매활성적영향:모형대조조혈청곡병전안매활성명현고우정상대조조(t=13.8,P<0.01),옥죽제취물A 3개실험조혈청곡병전안매활성저우모형대조조,우이옥죽제취물A 2 g/kg조여모형대조조차이최명현(t=5.62,P<0.01),차존재제량의뢰관계.③옥죽제취물A대T림파세포전화증치적영향:도두단백A자격체외배양적각조비림파세포,모형대조조적자격지수명현고우정상대조조(t=9.02,P<0.01),옥죽제취물A 3개실험조적자격지수명현저우모형대조조(t=6.99～11.06,P<0.01),차존재제량의뢰관계.④옥죽제취물A대비조직T림파세포아군적영향:각조,CD4+T,CD8+T림파세포적수량화비례차이불명현(P>0.05).결론:①옥죽제취물A구유억제간세포파배급개선간장미순배적작용.②옥죽제취물A가이현저억제T림파세포적전화증식,병정제량의뢰관계,옥죽제취물A발휘간보호작용적일개궤제가능취시현저억제T림파세포적전화증식,감소간손상세포인자적석방,억제활화증식적T림파세포대간세포적직접세포독작용.③재간손상적조기가능지시대량면역세포취집우간장병차각충분비급파배공능증강,이비기수량명현증가.