中国生化药物杂志
中國生化藥物雜誌
중국생화약물잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMICAL PHARMACEUTICS
2006年
5期
262-266
,共5页
肠毒素%超抗原%克隆表达%阴离子交换色谱%分子筛色谱%四甲基偶氮唑盐法%生物学活性
腸毒素%超抗原%剋隆錶達%陰離子交換色譜%分子篩色譜%四甲基偶氮唑鹽法%生物學活性
장독소%초항원%극륭표체%음리자교환색보%분자사색보%사갑기우담서염법%생물학활성
目的 克隆金黄色葡萄球菌肠毒素C2(SEC2)基因在E.coli重组表达,纯化重组SEC2(rSEC2)并进行生物学活性分析.方法 PCR获得正确编码SEC2的基因片断,构建表达质粒pET -28a-sec2在E.coli BL21中表达.利用离子交换和分子筛色谱纯化rSEC2,四甲基偶氮唑盐(MTT)法对rSEC2和天然SEC2(nSEC2)生物学活性进行分析和比较.结果 可溶性rSEC2占菌体总蛋白质的40%,两步纯化后蛋白质纯度约达9 5%,rSEC2和nSEC2均具有显著的超抗原活性.结论 成功获得与nSEC2有着类似活性的高纯度rSEC2,为进一步研究该蛋白质的抗肿瘤机理奠定物质基础.
目的 剋隆金黃色葡萄毬菌腸毒素C2(SEC2)基因在E.coli重組錶達,純化重組SEC2(rSEC2)併進行生物學活性分析.方法 PCR穫得正確編碼SEC2的基因片斷,構建錶達質粒pET -28a-sec2在E.coli BL21中錶達.利用離子交換和分子篩色譜純化rSEC2,四甲基偶氮唑鹽(MTT)法對rSEC2和天然SEC2(nSEC2)生物學活性進行分析和比較.結果 可溶性rSEC2佔菌體總蛋白質的40%,兩步純化後蛋白質純度約達9 5%,rSEC2和nSEC2均具有顯著的超抗原活性.結論 成功穫得與nSEC2有著類似活性的高純度rSEC2,為進一步研究該蛋白質的抗腫瘤機理奠定物質基礎.
목적 극륭금황색포도구균장독소C2(SEC2)기인재E.coli중조표체,순화중조SEC2(rSEC2)병진행생물학활성분석.방법 PCR획득정학편마SEC2적기인편단,구건표체질립pET -28a-sec2재E.coli BL21중표체.이용리자교환화분자사색보순화rSEC2,사갑기우담서염(MTT)법대rSEC2화천연SEC2(nSEC2)생물학활성진행분석화비교.결과 가용성rSEC2점균체총단백질적40%,량보순화후단백질순도약체9 5%,rSEC2화nSEC2균구유현저적초항원활성.결론 성공획득여nSEC2유착유사활성적고순도rSEC2,위진일보연구해단백질적항종류궤리전정물질기출.
