中国病毒学
中國病毒學
중국병독학
VIROLOGICA SINICA
2006年
6期
604-608
,共5页
张秉强%陈维贤%黄英%何茂锐%吴莹%张君%TONG-Chuang HE%黄爱龙
張秉彊%陳維賢%黃英%何茂銳%吳瑩%張君%TONG-Chuang HE%黃愛龍
장병강%진유현%황영%하무예%오형%장군%TONG-Chuang HE%황애룡
RNA干扰%Dicer%小发夹样RNA(shRNA)
RNA榦擾%Dicer%小髮夾樣RNA(shRNA)
RNA간우%Dicer%소발협양RNA(shRNA)
本文将Dicer基因的RNA酶III结构域作为靶区,设计并构建了两个抗Dicer基因的小发夹样RNA(shRNA)表达载体,将其转染2215、结肠癌TC细胞和基因组中整合有绿色荧光蛋白基因(GFP)的HepG2 A9细胞,通过RT-PCR评价RNA干扰抑制Dicer基因表达的效率;当HepG2 A9细胞Dicer基因表达被上述RNA干扰抑制时,再转染抗GFP的shRNA表达载体,通过RT-PCR和荧光显微镜观察GFP表达水平.结果显示,在不同细胞系中,这两个抗Dicer基因shRNA表达载体,均能明显抑制Dicer基因的表达;当Dicer基因受抑时,后续转染抗GFP的shRNA表达载体不能有效抑制GFP的表达.结果表明,抗Dicer基因shRNA表达载体,能够明显抑制Dicer基因的表达;shRNA表达载体的功能发挥需要Dicer酶的直接参与.
本文將Dicer基因的RNA酶III結構域作為靶區,設計併構建瞭兩箇抗Dicer基因的小髮夾樣RNA(shRNA)錶達載體,將其轉染2215、結腸癌TC細胞和基因組中整閤有綠色熒光蛋白基因(GFP)的HepG2 A9細胞,通過RT-PCR評價RNA榦擾抑製Dicer基因錶達的效率;噹HepG2 A9細胞Dicer基因錶達被上述RNA榦擾抑製時,再轉染抗GFP的shRNA錶達載體,通過RT-PCR和熒光顯微鏡觀察GFP錶達水平.結果顯示,在不同細胞繫中,這兩箇抗Dicer基因shRNA錶達載體,均能明顯抑製Dicer基因的錶達;噹Dicer基因受抑時,後續轉染抗GFP的shRNA錶達載體不能有效抑製GFP的錶達.結果錶明,抗Dicer基因shRNA錶達載體,能夠明顯抑製Dicer基因的錶達;shRNA錶達載體的功能髮揮需要Dicer酶的直接參與.
본문장Dicer기인적RNA매III결구역작위파구,설계병구건료량개항Dicer기인적소발협양RNA(shRNA)표체재체,장기전염2215、결장암TC세포화기인조중정합유록색형광단백기인(GFP)적HepG2 A9세포,통과RT-PCR평개RNA간우억제Dicer기인표체적효솔;당HepG2 A9세포Dicer기인표체피상술RNA간우억제시,재전염항GFP적shRNA표체재체,통과RT-PCR화형광현미경관찰GFP표체수평.결과현시,재불동세포계중,저량개항Dicer기인shRNA표체재체,균능명현억제Dicer기인적표체;당Dicer기인수억시,후속전염항GFP적shRNA표체재체불능유효억제GFP적표체.결과표명,항Dicer기인shRNA표체재체,능구명현억제Dicer기인적표체;shRNA표체재체적공능발휘수요Dicer매적직접삼여.
