大豆科学
大豆科學
대두과학
SOYBEAN SCIENCE
2007年
1期
11-15
,共5页
乞永艳%刘富海%Arnaud Bovy%Jan Cordewener%Froukie Vander Wal
乞永豔%劉富海%Arnaud Bovy%Jan Cordewener%Froukie Vander Wal
걸영염%류부해%Arnaud Bovy%Jan Cordewener%Froukie Vander Wal
二维电泳%大豆%子叶%微粒体膜结合蛋白
二維電泳%大豆%子葉%微粒體膜結閤蛋白
이유전영%대두%자협%미립체막결합단백
以硝酸银诱导的大豆子叶为材料,初步探讨了二维电泳技术在分离大豆子叶微粒体膜结合蛋白中的应用,研究了重新水化溶液的组成、加样量、等电聚焦的total voltage hours以及不同pH梯度范围IPG(固相pH梯度)胶条等因素对膜蛋白的溶解和二维电泳图像的影响.结果表明对于70×3×0.5mm IPG胶条,能够溶解较多蛋白质和获得高质量二维电泳图像的优化条件为:由尿素、硫脲、三丁基膦和C7BZO组成的重新水化溶液(TUC7T2)、80μg的加样量和20000vhr的total voltage hour.在此优化条件下,与宽范围pH梯度IPG胶条相比,使用窄范围pH梯度胶条可以观察到更多的和质量更好的蛋白质点,结果发现至少有13个点只存在于硝酸银诱导的样品中,而不存在于对照中,其代表的蛋白质的等电点在4.0～8.0.
以硝痠銀誘導的大豆子葉為材料,初步探討瞭二維電泳技術在分離大豆子葉微粒體膜結閤蛋白中的應用,研究瞭重新水化溶液的組成、加樣量、等電聚焦的total voltage hours以及不同pH梯度範圍IPG(固相pH梯度)膠條等因素對膜蛋白的溶解和二維電泳圖像的影響.結果錶明對于70×3×0.5mm IPG膠條,能夠溶解較多蛋白質和穫得高質量二維電泳圖像的優化條件為:由尿素、硫脲、三丁基膦和C7BZO組成的重新水化溶液(TUC7T2)、80μg的加樣量和20000vhr的total voltage hour.在此優化條件下,與寬範圍pH梯度IPG膠條相比,使用窄範圍pH梯度膠條可以觀察到更多的和質量更好的蛋白質點,結果髮現至少有13箇點隻存在于硝痠銀誘導的樣品中,而不存在于對照中,其代錶的蛋白質的等電點在4.0～8.0.
이초산은유도적대두자협위재료,초보탐토료이유전영기술재분리대두자협미립체막결합단백중적응용,연구료중신수화용액적조성、가양량、등전취초적total voltage hours이급불동pH제도범위IPG(고상pH제도)효조등인소대막단백적용해화이유전영도상적영향.결과표명대우70×3×0.5mm IPG효조,능구용해교다단백질화획득고질량이유전영도상적우화조건위:유뇨소、류뇨、삼정기련화C7BZO조성적중신수화용액(TUC7T2)、80μg적가양량화20000vhr적total voltage hour.재차우화조건하,여관범위pH제도IPG효조상비,사용착범위pH제도효조가이관찰도경다적화질량경호적단백질점,결과발현지소유13개점지존재우초산은유도적양품중,이불존재우대조중,기대표적단백질적등전점재4.0～8.0.
