四川大学学报(医学版)
四川大學學報(醫學版)
사천대학학보(의학판)
JOURNAL OF WEST CHINA UNIVERSITY OF MEDICAL SCIENCES
2007年
2期
202-204,221
,共4页
高绪芳%饶朝龙%文卫华%衡正昌
高緒芳%饒朝龍%文衛華%衡正昌
고서방%요조룡%문위화%형정창
DNA损伤%定位检测%k-ras基因%依赖随机化末端连接物PCR
DNA損傷%定位檢測%k-ras基因%依賴隨機化末耑連接物PCR
DNA손상%정위검측%k-ras기인%의뢰수궤화말단련접물PCR
目的 研究在核酸序列水平定位DNA损伤的方法.方法 培养TK6细胞,抽提基因组DNA,制备k-ras基因外显子2的单链探针.酶切基因组DNA构建损伤模型,应用依赖随机化末端连接物PCR(RDPCR)进行Southern blot,对产物进行测序.结果 酶切DNA的RDPCR产物在相应位置出现杂交条带,测序证实损伤位于HinfⅠ在k-ras外显子2的酶切位点.结论 将RDPCR和测序技术结合在一起,可在核酸水平上准确定位DNA损伤的碱基位置.
目的 研究在覈痠序列水平定位DNA損傷的方法.方法 培養TK6細胞,抽提基因組DNA,製備k-ras基因外顯子2的單鏈探針.酶切基因組DNA構建損傷模型,應用依賴隨機化末耑連接物PCR(RDPCR)進行Southern blot,對產物進行測序.結果 酶切DNA的RDPCR產物在相應位置齣現雜交條帶,測序證實損傷位于HinfⅠ在k-ras外顯子2的酶切位點.結論 將RDPCR和測序技術結閤在一起,可在覈痠水平上準確定位DNA損傷的堿基位置.
목적 연구재핵산서렬수평정위DNA손상적방법.방법 배양TK6세포,추제기인조DNA,제비k-ras기인외현자2적단련탐침.매절기인조DNA구건손상모형,응용의뢰수궤화말단련접물PCR(RDPCR)진행Southern blot,대산물진행측서.결과 매절DNA적RDPCR산물재상응위치출현잡교조대,측서증실손상위우HinfⅠ재k-ras외현자2적매절위점.결론 장RDPCR화측서기술결합재일기,가재핵산수평상준학정위DNA손상적감기위치.