广西植物
廣西植物
엄서식물
GUIHAIA
2008年
1期
117-120
,共4页
姜明国%何小丹%裴氏秋河%江欢欢%黄永颜%陈保善
薑明國%何小丹%裴氏鞦河%江歡歡%黃永顏%陳保善
강명국%하소단%배씨추하%강환환%황영안%진보선
蛋白质提取%双向凝胶电泳%蛋白质组%板栗疫病菌
蛋白質提取%雙嚮凝膠電泳%蛋白質組%闆慄疫病菌
단백질제취%쌍향응효전영%단백질조%판률역병균
双向凝胶电泳技术是蛋白质组学研究的基础性技术平台.如何得到一张高质量的双向凝胶电泳图谱是进行后续研究的关键.为探索适用于板栗疫病菌可溶性总蛋白的最佳提取条件,从蛋白组学角度来探索板栗疫病菌致病性机理,比较了目前在丝状真菌中常用的两种蛋白质提取方法,制备的蛋白质样品经双向凝胶电泳后,在凝胶上呈现的蛋白质斑点的丰度和分布特点.结果表明,两种方法获得的蛋白质主要集中分布在pH4～7的范围内;TCA-丙酮沉淀法得到的图谱分辨率高但是蛋白质总量很少.裂解液-TCA-丙酮沉淀法得到的蛋白质总量较大,通过cleanup kit处理后图谱分辨率可以达到差异蛋白组的要求.随机提取几个银染蛋白点用MALDI-TOF MS/MS进行分析,可以得到高质量的肽质量指纹谱.表明该样品制备方法可以满足蛋白质鉴定的要求.
雙嚮凝膠電泳技術是蛋白質組學研究的基礎性技術平檯.如何得到一張高質量的雙嚮凝膠電泳圖譜是進行後續研究的關鍵.為探索適用于闆慄疫病菌可溶性總蛋白的最佳提取條件,從蛋白組學角度來探索闆慄疫病菌緻病性機理,比較瞭目前在絲狀真菌中常用的兩種蛋白質提取方法,製備的蛋白質樣品經雙嚮凝膠電泳後,在凝膠上呈現的蛋白質斑點的豐度和分佈特點.結果錶明,兩種方法穫得的蛋白質主要集中分佈在pH4～7的範圍內;TCA-丙酮沉澱法得到的圖譜分辨率高但是蛋白質總量很少.裂解液-TCA-丙酮沉澱法得到的蛋白質總量較大,通過cleanup kit處理後圖譜分辨率可以達到差異蛋白組的要求.隨機提取幾箇銀染蛋白點用MALDI-TOF MS/MS進行分析,可以得到高質量的肽質量指紋譜.錶明該樣品製備方法可以滿足蛋白質鑒定的要求.
쌍향응효전영기술시단백질조학연구적기출성기술평태.여하득도일장고질량적쌍향응효전영도보시진행후속연구적관건.위탐색괄용우판률역병균가용성총단백적최가제취조건,종단백조학각도래탐색판률역병균치병성궤리,비교료목전재사상진균중상용적량충단백질제취방법,제비적단백질양품경쌍향응효전영후,재응효상정현적단백질반점적봉도화분포특점.결과표명,량충방법획득적단백질주요집중분포재pH4～7적범위내;TCA-병동침정법득도적도보분변솔고단시단백질총량흔소.렬해액-TCA-병동침정법득도적단백질총량교대,통과cleanup kit처리후도보분변솔가이체도차이단백조적요구.수궤제취궤개은염단백점용MALDI-TOF MS/MS진행분석,가이득도고질량적태질량지문보.표명해양품제비방법가이만족단백질감정적요구.
