应用酵母双杂交技术筛选与乙型肝炎病毒e抗原结合蛋白2结合的肝细胞蛋白编码基因
응용효모쌍잡교기술사선여을형간염병독e항원결합단백2결합적간세포단백편마기인
Screening exonic genes of proteins in hepatocytes interacting with HBEBP2 by yeast two-hybrid technique
  • 万方数据
    解放军医学杂志 해방군의학잡지
    MEDICAL JOURNAL OF CHINESE PEOPLE'S LIBERATION ARMY
    2008年 7期 793-795 ,共3页

    粱赟磊%成军%邢卉春%王琦%李越%张斌%樊万虎%袁菊%张黎颖%洪源

    량빈뢰%성군%형훼춘%왕기%리월%장빈%번만호%원국%장려영%홍원

    肝炎病毒%乙型%HBEBP2%双杂交系统技术%蛋白质相互作用 肝炎病毒%乙型%HBEBP2%雙雜交繫統技術%蛋白質相互作用
    간염병독%을형%HBEBP2%쌍잡교계통기술%단백질상호작용
    目的 构建乙型肝炎病毒e抗原结合蛋白2(HBEBP2)的真核表达载体并筛选人肝细胞中与HBEBP2相互作用的基因.方法 通过PCR扩增获得HBEBP2基因,构建真核表达载体pGBKT7-HBEBP2,转化酵母菌AH109并在其中进行表达.随后与预转化了人肝细胞文库质粒pACT2的酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基(SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade)和铺有X-α-gal的营养缺陷型培养基(SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade)上进行双重筛选获得阳性克隆.提取文库质粒pACT2-DNA并与pGBKT7-HBEBP2共同转化AH109酵母菌株,于铺有X-α-gal的营养缺陷型培养基(SD/-Tm/-Leu/-His/-Ade)上进行筛选以排除假阳性克隆.挑取真阳性克隆送测序,并进行生物信息学分析.结果 筛选出6种与HBEBP2相互作用的蛋白,其中包括人类线粒体蛋白、人类α-2-糖蛋白1、人类磷酸甘露糖-p-长醇利用缺陷1和人类丝氨酸蛋白酶抑制剂等4个已知功能蛋白及2个未知功能序列.结论 筛出人肝细胞中一组与HBEBP2相互作用的蛋白,为进一步探讨HBEBP2在HBV致病过程中的作用奠定了基础.
    목적 구건을형간염병독e항원결합단백2(HBEBP2)적진핵표체재체병사선인간세포중여HBEBP2상호작용적기인.방법 통과PCR확증획득HBEBP2기인,구건진핵표체재체pGBKT7-HBEBP2,전화효모균AH109병재기중진행표체.수후여예전화료인간세포문고질립pACT2적효모세포Y187진행배합,재영양결함형배양기(SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade)화포유X-α-gal적영양결함형배양기(SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade)상진행쌍중사선획득양성극륭.제취문고질립pACT2-DNA병여pGBKT7-HBEBP2공동전화AH109효모균주,우포유X-α-gal적영양결함형배양기(SD/-Tm/-Leu/-His/-Ade)상진행사선이배제가양성극륭.도취진양성극륭송측서,병진행생물신식학분석.결과 사선출6충여HBEBP2상호작용적단백,기중포괄인류선립체단백、인류α-2-당단백1、인류린산감로당-p-장순이용결함1화인류사안산단백매억제제등4개이지공능단백급2개미지공능서렬.결론 사출인간세포중일조여HBEBP2상호작용적단백,위진일보탐토HBEBP2재HBV치병과정중적작용전정료기출.
    원문보기 원문다운로드 사이트로이동
저자의 최근 논문