中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2008年
8期
704-707
,共4页
何卓%汪世平%周帅锋%秦永华%高冬梅%汪希雅%李林%余路新%徐绍锐
何卓%汪世平%週帥鋒%秦永華%高鼕梅%汪希雅%李林%餘路新%徐紹銳
하탁%왕세평%주수봉%진영화%고동매%왕희아%리림%여로신%서소예
日本血吸虫%未成熟卵可溶性抗原(SIEA)%单链抗体(scFv)%增强型绿色荧光蛋白(EGFP)%靶向性
日本血吸蟲%未成熟卵可溶性抗原(SIEA)%單鏈抗體(scFv)%增彊型綠色熒光蛋白(EGFP)%靶嚮性
일본혈흡충%미성숙란가용성항원(SIEA)%단련항체(scFv)%증강형록색형광단백(EGFP)%파향성
目的 体外观察抗日本血吸虫生殖功能分子SIEA26～28kDa单链抗体与日本血吸虫各阶段的靶向部位,探讨单链抗体在抗血吸虫病疫苗研究中的应用价值.方法 扩增增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因,克隆至PET32a/SIEA26～28kDa-scFv质粒,构建PET32a/EGFP-scFv质粒.转化至感受态E.coli BL21(DE3)中,并诱导表达单链抗体融合蛋白,分析单链抗体融合蛋白与SIEA26～28kDa的结合特异性.单链抗体融合蛋白与日本血吸虫成虫、虫卵切片孵育,荧光显微镜下观测GFP信号,确定特异性单链抗体的靶向性.结果 重组质粒PET32a/EGFP-scFv构建成功,Trx-EGFP-scFv融合蛋白高效表达,与SIEA26～28kDa特异性结合.GFP信号主要集中在未成熟卵卵胚,雌虫卵巢、卵黄腺及与生殖系统邻近的肠腔组织.结论 SIEA26～28kDa单链抗体与血吸虫未成熟卵胚胎及雌虫生殖系统具有较强的靶向性,具有潜在抗卵胚发育、抗雌虫生殖作用,为SIEA26～28kDa单链抗体在抗日本血吸虫病疫苗免疫靶向方面的研究奠定了基础.
目的 體外觀察抗日本血吸蟲生殖功能分子SIEA26～28kDa單鏈抗體與日本血吸蟲各階段的靶嚮部位,探討單鏈抗體在抗血吸蟲病疫苗研究中的應用價值.方法 擴增增彊型綠色熒光蛋白(EGFP)基因,剋隆至PET32a/SIEA26～28kDa-scFv質粒,構建PET32a/EGFP-scFv質粒.轉化至感受態E.coli BL21(DE3)中,併誘導錶達單鏈抗體融閤蛋白,分析單鏈抗體融閤蛋白與SIEA26～28kDa的結閤特異性.單鏈抗體融閤蛋白與日本血吸蟲成蟲、蟲卵切片孵育,熒光顯微鏡下觀測GFP信號,確定特異性單鏈抗體的靶嚮性.結果 重組質粒PET32a/EGFP-scFv構建成功,Trx-EGFP-scFv融閤蛋白高效錶達,與SIEA26～28kDa特異性結閤.GFP信號主要集中在未成熟卵卵胚,雌蟲卵巢、卵黃腺及與生殖繫統鄰近的腸腔組織.結論 SIEA26～28kDa單鏈抗體與血吸蟲未成熟卵胚胎及雌蟲生殖繫統具有較彊的靶嚮性,具有潛在抗卵胚髮育、抗雌蟲生殖作用,為SIEA26～28kDa單鏈抗體在抗日本血吸蟲病疫苗免疫靶嚮方麵的研究奠定瞭基礎.
목적 체외관찰항일본혈흡충생식공능분자SIEA26～28kDa단련항체여일본혈흡충각계단적파향부위,탐토단련항체재항혈흡충병역묘연구중적응용개치.방법 확증증강형록색형광단백(EGFP)기인,극륭지PET32a/SIEA26～28kDa-scFv질립,구건PET32a/EGFP-scFv질립.전화지감수태E.coli BL21(DE3)중,병유도표체단련항체융합단백,분석단련항체융합단백여SIEA26～28kDa적결합특이성.단련항체융합단백여일본혈흡충성충、충란절편부육,형광현미경하관측GFP신호,학정특이성단련항체적파향성.결과 중조질립PET32a/EGFP-scFv구건성공,Trx-EGFP-scFv융합단백고효표체,여SIEA26～28kDa특이성결합.GFP신호주요집중재미성숙란란배,자충란소、란황선급여생식계통린근적장강조직.결론 SIEA26～28kDa단련항체여혈흡충미성숙란배태급자충생식계통구유교강적파향성,구유잠재항란배발육、항자충생식작용,위SIEA26～28kDa단련항체재항일본혈흡충병역묘면역파향방면적연구전정료기출.
