CAJ | 학술논문

为了对SRAP分子标记在辣椒中的应用进行优化,试验采用正交设计L16(45),在4个水平上对影响辣椒SRAP反应体系的Taq酶浓度、Mg2+含量、模板DNA用量、dNTP浓度及引物用量等5个因素进行了优化,并用单因素完全随机试验筛选各反应因素的最佳水平,建立了辣椒SRAP分子标记的最佳体系.结果表明,在10μL反应体系中,Taq酶最适浓度为1.5 U、Mg2+最适浓度为1.5 mmol/L、模板DNA最适用量为100 ng、dNTP最适用量为0.3 mmol/L、引物最适浓度为0.1 μmol/L.利用20个辣椒材料来验证此反应体系,6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果显示,扩增产物在350～750 bp之间多态性高,且反应体系的稳定性和重复性好.通过优化的SRAP分子标记对F1代辣椒种子航椒4号进行纯度检测,检测结果为98%,与其田间检测结果100%十分接近.表明了SRAP分子标记技术是鉴定辣椒一代杂种纯度的有效方法,具有准确、可靠、快速的特点,在辣椒杂交种子纯度室内快速检测中有很大的应用前景.
위료대SRAP분자표기재랄초중적응용진행우화,시험채용정교설계L16(45),재4개수평상대영향랄초SRAP반응체계적Taq매농도、Mg2+함량、모판DNA용량、dNTP농도급인물용량등5개인소진행료우화,병용단인소완전수궤시험사선각반응인소적최가수평,건립료랄초SRAP분자표기적최가체계.결과표명,재10μL반응체계중,Taq매최괄농도위1.5 U、Mg2+최괄농도위1.5 mmol/L、모판DNA최괄용량위100 ng、dNTP최괄용량위0.3 mmol/L、인물최괄농도위0.1 μmol/L.이용20개랄초재료래험증차반응체계,6%변성취병희선알응효전영검측결과현시,확증산물재350～750 bp지간다태성고,차반응체계적은정성화중복성호.통과우화적SRAP분자표기대F1대랄초충자항초4호진행순도검측,검측결과위98%,여기전간검측결과100%십분접근.표명료SRAP분자표기기술시감정랄초일대잡충순도적유효방법,구유준학、가고、쾌속적특점,재랄초잡교충자순도실내쾌속검측중유흔대적응용전경.