CAJ | 학술논문

本研究旨在探讨鸡NLRC5受体及IFN基因对不同细菌内毒素的诱导表达变化,为禽类NLRC5受体的分子功能及其参与先天免疫调控的作用机制提供理论依据.用不同浓度的(0、0.1、1.0、10.0 μg·mL-1)来自致病性大肠杆菌(E.coli,EC)和肠炎沙门氏菌(S.enteriditis,SE)的2种内毒素(LPS)分别刺激鸡天然巨噬细胞系(HD11)2、4和6h,在不同的时间点收集细胞,提取总RNA,并设计相关引物,利用荧光定量PCR分析鸡NLRC5受体以及下游功能基因IFNA和IFNB的转录量变化,探讨HD11细胞对不同来源的细菌内毒素的免疫反应.研究表明:与对照组相比,1.0和10.0μg·mL-1的EC-LPS、SE-LPS均能诱导HD11细胞产生免疫应答,但0.1μg·mL-1组未能诱导成功；不同细菌LPS诱导的免疫应答时间不一致,经EC-LPS诱导的NLRC5和IFNB基因均在刺激后6h达到转录高峰,与2、4h差异显著(P＜0.05),与对照组差异极显著(P＜0.01)；但IFNA基因在2、6h达到高峰,而在4h下降,呈“V”型转录趋势.SE-LPS诱导的NLRC5和IFNA、IFNB转录量随时间均保持一直上升的趋势,在6h达到高峰,且与对照组及2、4h差异显著(P＜0.05).结果表明NLRC5受体与IFNA和IFNs共同参与了细胞对细菌内毒素的免疫应答,NLRC5基因可能对鸡先天免疫功能具有调节作用.
본연구지재탐토계NLRC5수체급IFN기인대불동세균내독소적유도표체변화,위금류NLRC5수체적분자공능급기삼여선천면역조공적작용궤제제공이론의거.용불동농도적(0、0.1、1.0、10.0 μg·mL-1)래자치병성대장간균(E.coli,EC)화장염사문씨균(S.enteriditis,SE)적2충내독소(LPS)분별자격계천연거서세포계(HD11)2、4화6h,재불동적시간점수집세포,제취총RNA,병설계상관인물,이용형광정량PCR분석계NLRC5수체이급하유공능기인IFNA화IFNB적전록량변화,탐토HD11세포대불동래원적세균내독소적면역반응.연구표명:여대조조상비,1.0화10.0μg·mL-1적EC-LPS、SE-LPS균능유도HD11세포산생면역응답,단0.1μg·mL-1조미능유도성공；불동세균LPS유도적면역응답시간불일치,경EC-LPS유도적NLRC5화IFNB기인균재자격후6h체도전록고봉,여2、4h차이현저(P＜0.05),여대조조차이겁현저(P＜0.01)；단IFNA기인재2、6h체도고봉,이재4h하강,정“V”형전록추세.SE-LPS유도적NLRC5화IFNA、IFNB전록량수시간균보지일직상승적추세,재6h체도고봉,차여대조조급2、4h차이현저(P＜0.05).결과표명NLRC5수체여IFNA화IFNs공동삼여료세포대세균내독소적면역응답,NLRC5기인가능대계선천면역공능구유조절작용.