CAJ | 학술논문

为研究Wnt/β-catenin信号通路对猪骨骼肌纤维类型发育的影响,并探讨其潜在的作用机制.本研究以1日龄、1周龄、2周龄、1月龄、2月龄和6月龄大白猪背最长肌组织为研究材料,利用Real-time PCR、Westernblot、冰冻切片免疫组化等方法,研究Wnt/β-catenin信号通路相关基因及MyHCs在猪骨骼肌发育过程中的表达规律.Real-time PCR结果显示:MyHC-Ⅰ、GSK-3β、#catenin和Fz3 mRNA随着个体日龄增加表达量下降,MyHC-Ⅱb mRNA表达逐渐升高,MyHC-Ⅱa mRNA表达量在1日龄～2周龄阶段升高后又降低,MyHC-Ⅱx mRNA 表达量变化不显著；免疫组化结果显示:快肌蛋白呈棕色,慢肌蛋白呈灰白色,在出生1日龄～1周龄时,快、慢肌呈弥散交叉分布,到2周龄时慢肌簇被快肌包被在肌束中间,随着年龄增加,慢肌簇逐渐减少.Western blot检测结果显示:慢肌蛋白从出生到2周龄显著下降,在2周龄～2月龄阶段下降不明显,生长到6月龄时又显著降低；快肌蛋白随日龄增加而增加,在2周龄～6月龄期间增加极显著；β-catenin、GSK-3β蛋白表达量与其mRNA表达一致,而p-β-catenin在2周龄时显著高于1日龄,且随后持续上调；Tyr216p-GSK-3β蛋白表达量早期生长下调极显著；ser9 p-GSK-3β蛋白表达量则是在后期生长显著降低.上述基因表达变化规律揭示,Wnt/β-catenin信号通路相关基因β-catenin、Fz3、GSK-3β与MyHC-Ⅰ表达呈正相关,与MyHC-Ⅱ表达呈负相关,其在骨骼肌生长过程中对肌纤维类型组成具有重要影响.
위연구Wnt/β-catenin신호통로대저골격기섬유류형발육적영향,병탐토기잠재적작용궤제.본연구이1일령、1주령、2주령、1월령、2월령화6월령대백저배최장기조직위연구재료,이용Real-time PCR、Westernblot、빙동절편면역조화등방법,연구Wnt/β-catenin신호통로상관기인급MyHCs재저골격기발육과정중적표체규률.Real-time PCR결과현시:MyHC-Ⅰ、GSK-3β、#catenin화Fz3 mRNA수착개체일령증가표체량하강,MyHC-Ⅱb mRNA표체축점승고,MyHC-Ⅱa mRNA표체량재1일령～2주령계단승고후우강저,MyHC-Ⅱx mRNA 표체량변화불현저；면역조화결과현시:쾌기단백정종색,만기단백정회백색,재출생1일령～1주령시,쾌、만기정미산교차분포,도2주령시만기족피쾌기포피재기속중간,수착년령증가,만기족축점감소.Western blot검측결과현시:만기단백종출생도2주령현저하강,재2주령～2월령계단하강불명현,생장도6월령시우현저강저；쾌기단백수일령증가이증가,재2주령～6월령기간증가겁현저；β-catenin、GSK-3β단백표체량여기mRNA표체일치,이p-β-catenin재2주령시현저고우1일령,차수후지속상조；Tyr216p-GSK-3β단백표체량조기생장하조겁현저；ser9 p-GSK-3β단백표체량칙시재후기생장현저강저.상술기인표체변화규률게시,Wnt/β-catenin신호통로상관기인β-catenin、Fz3、GSK-3β여MyHC-Ⅰ표체정정상관,여MyHC-Ⅱ표체정부상관,기재골격기생장과정중대기섬유류형조성구유중요영향.