中国抗生素杂志
中國抗生素雜誌
중국항생소잡지
CHINESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS
2012年
9期
666-670
,共5页
黑暗链霉菌%接合转移%安普霉素%生物合成
黑暗鏈黴菌%接閤轉移%安普黴素%生物閤成
흑암련매균%접합전이%안보매소%생물합성
以黑暗链霉菌Tt-49基因组为模板,利用PCR方法,扩增安普霉素生物合成关键基因aprH～M的上、下游序列,作为同源交换臂,并以温敏复制型质粒pKC1139为基础,构建用于阻断黑暗链霉菌Tt-49中安普霉素生物合成的重组质粒pHM106.质粒经接合转移进入黑暗链霉菌Tt-49,并筛选得到发生同源双交换工程菌,命名为黑暗链霉菌HM106.通过PCR鉴定,证明工程菌HM106中的aprH～M被tetr替换.对工程菌HM106进行发酵产物分析,结果是其发酵效价下降明显,仅为出发菌株的40％左右.采用薄层层析(TLC)对其组分分析,其安普霉素组分消失,因此,初步判断已成功阻断安普霉素的生物合成.
以黑暗鏈黴菌Tt-49基因組為模闆,利用PCR方法,擴增安普黴素生物閤成關鍵基因aprH～M的上、下遊序列,作為同源交換臂,併以溫敏複製型質粒pKC1139為基礎,構建用于阻斷黑暗鏈黴菌Tt-49中安普黴素生物閤成的重組質粒pHM106.質粒經接閤轉移進入黑暗鏈黴菌Tt-49,併篩選得到髮生同源雙交換工程菌,命名為黑暗鏈黴菌HM106.通過PCR鑒定,證明工程菌HM106中的aprH～M被tetr替換.對工程菌HM106進行髮酵產物分析,結果是其髮酵效價下降明顯,僅為齣髮菌株的40％左右.採用薄層層析(TLC)對其組分分析,其安普黴素組分消失,因此,初步判斷已成功阻斷安普黴素的生物閤成.
이흑암련매균Tt-49기인조위모판,이용PCR방법,확증안보매소생물합성관건기인aprH～M적상、하유서렬,작위동원교환비,병이온민복제형질립pKC1139위기출,구건용우조단흑암련매균Tt-49중안보매소생물합성적중조질립pHM106.질립경접합전이진입흑암련매균Tt-49,병사선득도발생동원쌍교환공정균,명명위흑암련매균HM106.통과PCR감정,증명공정균HM106중적aprH～M피tetr체환.대공정균HM106진행발효산물분석,결과시기발효효개하강명현,부위출발균주적40％좌우.채용박층층석(TLC)대기조분분석,기안보매소조분소실,인차,초보판단이성공조단안보매소적생물합성.
