中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2005年
5期
382-385
,共4页
杨向民%姚西英%邢金良%张思河%冯媛%陈志南
楊嚮民%姚西英%邢金良%張思河%馮媛%陳誌南
양향민%요서영%형금량%장사하%풍원%진지남
重链可变区%兼并引物%FR1区%同源序列
重鏈可變區%兼併引物%FR1區%同源序列
중련가변구%겸병인물%FR1구%동원서렬
目的获得抗人大肠癌单抗CAb-1重链可变区VH的准确基因.方法结合生物信息学同源比较分析,利用高兼并的FR1 5'端处引物扩增的单抗CAb-1的VH基因,并与数据库中序列比对,在同源性最高的抗体序列的信号肽处二次设计引物,用RT-PCR法获得抗体基因VH的准确序列.结果选定了与已知抗体VH高度同源的序列进行引物设计.凝胶电泳可见预期大小DNA条带.经测序表明,配对于信号肽处的扩增产物不仅与配对于抗体可变区FR1的结果一致,而且也纠正了配对于CAb-1的VH的FR1的兼并引物所引入的氨基酸突变.结论所优化设计的引物能够扩增完整的抗人大肠癌单抗CAb-1重链可变区基因,为小分子工程抗体改造奠定了基础.
目的穫得抗人大腸癌單抗CAb-1重鏈可變區VH的準確基因.方法結閤生物信息學同源比較分析,利用高兼併的FR1 5'耑處引物擴增的單抗CAb-1的VH基因,併與數據庫中序列比對,在同源性最高的抗體序列的信號肽處二次設計引物,用RT-PCR法穫得抗體基因VH的準確序列.結果選定瞭與已知抗體VH高度同源的序列進行引物設計.凝膠電泳可見預期大小DNA條帶.經測序錶明,配對于信號肽處的擴增產物不僅與配對于抗體可變區FR1的結果一緻,而且也糾正瞭配對于CAb-1的VH的FR1的兼併引物所引入的氨基痠突變.結論所優化設計的引物能夠擴增完整的抗人大腸癌單抗CAb-1重鏈可變區基因,為小分子工程抗體改造奠定瞭基礎.
목적획득항인대장암단항CAb-1중련가변구VH적준학기인.방법결합생물신식학동원비교분석,이용고겸병적FR1 5'단처인물확증적단항CAb-1적VH기인,병여수거고중서렬비대,재동원성최고적항체서렬적신호태처이차설계인물,용RT-PCR법획득항체기인VH적준학서렬.결과선정료여이지항체VH고도동원적서렬진행인물설계.응효전영가견예기대소DNA조대.경측서표명,배대우신호태처적확증산물불부여배대우항체가변구FR1적결과일치,이차야규정료배대우CAb-1적VH적FR1적겸병인물소인입적안기산돌변.결론소우화설계적인물능구확증완정적항인대장암단항CAb-1중련가변구기인,위소분자공정항체개조전정료기출.
