中山大学学报（自然科学版）
中山大學學報（自然科學版）
중산대학학보（자연과학판）
ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS SUNYATSENI
2007年
1期
86-90
,共5页
陈之林%段俊%曾宋君%梁承邺%叶秀粦
陳之林%段俊%曾宋君%樑承鄴%葉秀粦
진지림%단준%증송군%량승업%협수린
石斛%原球茎%农杆菌%遗传转化
石斛%原毬莖%農桿菌%遺傳轉化
석곡%원구경%농간균%유전전화
以携带双元载体pCAMBIA1305.1的农杆菌菌株EHA105转化石斛种子萌发形成的原球茎,通过GUS瞬时表达检测对受体状态、农杆菌活化条件、共培养时间等转化影响因子进行了优化;共培养4 d的原球茎接种到含有30 mg/L 潮霉素(Hyg)和500 mg/L 头孢噻肟钠的愈伤组织诱导与增殖培养基上以获得潮霉素抗性的愈伤组织,抗性愈伤组织在含Hyg 50 mg/L的再生培养基上再生植株,抗性株经GUS组织化学、PCR和PCR-southern blot检测证明为转化株.
以攜帶雙元載體pCAMBIA1305.1的農桿菌菌株EHA105轉化石斛種子萌髮形成的原毬莖,通過GUS瞬時錶達檢測對受體狀態、農桿菌活化條件、共培養時間等轉化影響因子進行瞭優化;共培養4 d的原毬莖接種到含有30 mg/L 潮黴素(Hyg)和500 mg/L 頭孢噻肟鈉的愈傷組織誘導與增殖培養基上以穫得潮黴素抗性的愈傷組織,抗性愈傷組織在含Hyg 50 mg/L的再生培養基上再生植株,抗性株經GUS組織化學、PCR和PCR-southern blot檢測證明為轉化株.
이휴대쌍원재체pCAMBIA1305.1적농간균균주EHA105전화석곡충자맹발형성적원구경,통과GUS순시표체검측대수체상태、농간균활화조건、공배양시간등전화영향인자진행료우화;공배양4 d적원구경접충도함유30 mg/L 조매소(Hyg)화500 mg/L 두포새우납적유상조직유도여증식배양기상이획득조매소항성적유상조직,항성유상조직재함Hyg 50 mg/L적재생배양기상재생식주,항성주경GUS조직화학、PCR화PCR-southern blot검측증명위전화주.
