西北农林科技大学学报（自然科学版）
西北農林科技大學學報（自然科學版）
서북농림과기대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF NORTHWEST SCI-TECH UNIVERSITY OF AGRICULTURE AND FORESTRY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2008年
3期
44-48
,共5页
鸡传染性法氏囊病病毒%反转录-聚合酶链式反应%限制性内切酶分析
鷄傳染性法氏囊病病毒%反轉錄-聚閤酶鏈式反應%限製性內切酶分析
계전염성법씨낭병병독%반전록-취합매련식반응%한제성내절매분석
[目的]利用限制性酶切位点的特异性,鉴别IBDV超强毒株、强毒株及疫苗株.[方法]根据IBDVVP2基因的共保守序列设计1对引物,分别以IBDV超强毒株GX8/99、陕西分离株、强毒株(XZ-1、ZZ-1、JL、Gx-2、JS-2、SD-1、SD-3、HeN-4、ZJ-1、JX-2、JS-30)和疫苗株(B87、NF8)的VP2保守序列为模板,采用RT-PCR方法扩增VP2基因的共保守序列,并构建IBDV不同毒株的重组质粒.用Aha Ⅰ/Stu Ⅰ和BamH Ⅰ/NspⅠ 2组限制性内切酶分别对超强毒株、强毒株及疫苗株的重组质粒进行酶切鉴定.[结果]扩增出了IBDV VP2基因中的共保守序列,其长度为802 bp.超强毒株能被Aha Ⅰ/Stu Ⅰ切出327 bp的片段,而强毒株及疫苗株则能被BamH Ⅰ/Nsp Ⅰ切出270 bp的片段.[结论]此种RT-PCR结合限制性内切酶酶切的鉴别方法能够很好的区分IBDV超强毒株与强毒株和疫苗株.
[目的]利用限製性酶切位點的特異性,鑒彆IBDV超彊毒株、彊毒株及疫苗株.[方法]根據IBDVVP2基因的共保守序列設計1對引物,分彆以IBDV超彊毒株GX8/99、陝西分離株、彊毒株(XZ-1、ZZ-1、JL、Gx-2、JS-2、SD-1、SD-3、HeN-4、ZJ-1、JX-2、JS-30)和疫苗株(B87、NF8)的VP2保守序列為模闆,採用RT-PCR方法擴增VP2基因的共保守序列,併構建IBDV不同毒株的重組質粒.用Aha Ⅰ/Stu Ⅰ和BamH Ⅰ/NspⅠ 2組限製性內切酶分彆對超彊毒株、彊毒株及疫苗株的重組質粒進行酶切鑒定.[結果]擴增齣瞭IBDV VP2基因中的共保守序列,其長度為802 bp.超彊毒株能被Aha Ⅰ/Stu Ⅰ切齣327 bp的片段,而彊毒株及疫苗株則能被BamH Ⅰ/Nsp Ⅰ切齣270 bp的片段.[結論]此種RT-PCR結閤限製性內切酶酶切的鑒彆方法能夠很好的區分IBDV超彊毒株與彊毒株和疫苗株.
[목적]이용한제성매절위점적특이성,감별IBDV초강독주、강독주급역묘주.[방법]근거IBDVVP2기인적공보수서렬설계1대인물,분별이IBDV초강독주GX8/99、협서분리주、강독주(XZ-1、ZZ-1、JL、Gx-2、JS-2、SD-1、SD-3、HeN-4、ZJ-1、JX-2、JS-30)화역묘주(B87、NF8)적VP2보수서렬위모판,채용RT-PCR방법확증VP2기인적공보수서렬,병구건IBDV불동독주적중조질립.용Aha Ⅰ/Stu Ⅰ화BamH Ⅰ/NspⅠ 2조한제성내절매분별대초강독주、강독주급역묘주적중조질립진행매절감정.[결과]확증출료IBDV VP2기인중적공보수서렬,기장도위802 bp.초강독주능피Aha Ⅰ/Stu Ⅰ절출327 bp적편단,이강독주급역묘주칙능피BamH Ⅰ/Nsp Ⅰ절출270 bp적편단.[결론]차충RT-PCR결합한제성내절매매절적감별방법능구흔호적구분IBDV초강독주여강독주화역묘주.
