中国医学科学院学报
中國醫學科學院學報
중국의학과학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE SINICAE
2008年
6期
690-695
,共6页
陈凤%郭雅彬%刘士廉%郑德先%刘彦信
陳鳳%郭雅彬%劉士廉%鄭德先%劉彥信
진봉%곽아빈%류사렴%정덕선%류언신
抗死亡受体5嵌合抗体%中国仓鼠卵巢细胞%人IgG轻链%人IgG重链
抗死亡受體5嵌閤抗體%中國倉鼠卵巢細胞%人IgG輕鏈%人IgG重鏈
항사망수체5감합항체%중국창서란소세포%인IgG경련%인IgG중련
目的 构建以人肿瘤坏死冈子相关凋亡诱导配体(TRAIL)受体死亡受体5(DR5)为抗原的鼠/人重组嵌合抗体.方法 采用基因工程技术,扩增和克隆抗DR5嵌合抗体的轻、重链表达载体,共转染二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞(CHO-dhfr),筛选稳定分泌表达抗DR5嵌合抗体的细胞株.采用ELISA和Western bloting法鉴定抗体的人源性和抗体-抗原结合活性,四唑盐/吩嗪硫酸甲酯比色法检测抗体的生物学活性.结果 获得了稳定表达和分泌抗人DR5的嵌合抗体(anti-DR5 mV-hH)的重组细胞;与人DR5蛋白具有高的特异性结合活性;能使体外培养的人髓性白血病Jurkat细胞和人结肠癌HCT116细胞的存活率分别下降到73.15%和77.30%.结论 抗DR5嵌合抗体anti-DR5 mV-hH具有抗肿瘤活性,为发展人源化抗体药物的研究奠定了基础.
目的 構建以人腫瘤壞死岡子相關凋亡誘導配體(TRAIL)受體死亡受體5(DR5)為抗原的鼠/人重組嵌閤抗體.方法 採用基因工程技術,擴增和剋隆抗DR5嵌閤抗體的輕、重鏈錶達載體,共轉染二氫葉痠還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞(CHO-dhfr),篩選穩定分泌錶達抗DR5嵌閤抗體的細胞株.採用ELISA和Western bloting法鑒定抗體的人源性和抗體-抗原結閤活性,四唑鹽/吩嗪硫痠甲酯比色法檢測抗體的生物學活性.結果 穫得瞭穩定錶達和分泌抗人DR5的嵌閤抗體(anti-DR5 mV-hH)的重組細胞;與人DR5蛋白具有高的特異性結閤活性;能使體外培養的人髓性白血病Jurkat細胞和人結腸癌HCT116細胞的存活率分彆下降到73.15%和77.30%.結論 抗DR5嵌閤抗體anti-DR5 mV-hH具有抗腫瘤活性,為髮展人源化抗體藥物的研究奠定瞭基礎.
목적 구건이인종류배사강자상관조망유도배체(TRAIL)수체사망수체5(DR5)위항원적서/인중조감합항체.방법 채용기인공정기술,확증화극륭항DR5감합항체적경、중련표체재체,공전염이경협산환원매결함형중국창서란소세포(CHO-dhfr),사선은정분비표체항DR5감합항체적세포주.채용ELISA화Western bloting법감정항체적인원성화항체-항원결합활성,사서염/분진류산갑지비색법검측항체적생물학활성.결과 획득료은정표체화분비항인DR5적감합항체(anti-DR5 mV-hH)적중조세포;여인DR5단백구유고적특이성결합활성;능사체외배양적인수성백혈병Jurkat세포화인결장암HCT116세포적존활솔분별하강도73.15%화77.30%.결론 항DR5감합항체anti-DR5 mV-hH구유항종류활성,위발전인원화항체약물적연구전정료기출.
