CAJ | 학술논문

利用改进的锚定PCR方法克隆了团头鲂(Megalobrama amblycephala)促性腺激素Ⅱβ(GtHⅡβ)亚基基因5'端侧翼序列,并在生物信息学方法分析的基础上构建了荧光素酶质粒表达载体.序列分析结果显示:克隆得到的GtHⅡβ亚基基因5'端侧翼序列长度为1 354 bp,其中包括TATA盒、ERE、ARE、PRE、GRE、LHX3、SF-1、Sp1、Pit-1、NF-Y和AP1等可能对GtHⅡβ亚基基因转录调控起重要作用的功能转录因子结合位点;转录起始位点位于-40～10 bp.进一步利用PCR方法扩增得到了811 bp(-771～+40bp)、601 bp(-561～+40bp)、386bp(-346～+40bp)、239bp(-199～+40 bp)和98 bp(-58～+40 bp)的5个缺失片段,并同全长片段一起分别连接至pGL3-Basic报告基因载体,成功构建了团头鲂GtHⅡβ亚基基因5'端侧翼序列的表达载体,为进一步研究、分析其转录调控机制提供了基础依据.
이용개진적묘정PCR방법극륭료단두방(Megalobrama amblycephala)촉성선격소Ⅱβ(GtHⅡβ)아기기인5'단측익서렬,병재생물신식학방법분석적기출상구건료형광소매질립표체재체.서렬분석결과현시:극륭득도적GtHⅡβ아기기인5'단측익서렬장도위1 354 bp,기중포괄TATA합、ERE、ARE、PRE、GRE、LHX3、SF-1、Sp1、Pit-1、NF-Y화AP1등가능대GtHⅡβ아기기인전록조공기중요작용적공능전록인자결합위점;전록기시위점위우-40～10 bp.진일보이용PCR방법확증득도료811 bp(-771～+40bp)、601 bp(-561～+40bp)、386bp(-346～+40bp)、239bp(-199～+40 bp)화98 bp(-58～+40 bp)적5개결실편단,병동전장편단일기분별련접지pGL3-Basic보고기인재체,성공구건료단두방GtHⅡβ아기기인5'단측익서렬적표체재체,위진일보연구、분석기전록조공궤제제공료기출의거.