蚕业科学
蠶業科學
잠업과학
ACTA SERICOLOGICA SINICA
2010年
5期
855-859
,共5页
王丹%BHASKAR Roy%李兴华%杨华军%周芳%缪云根%云涛%刘光清
王丹%BHASKAR Roy%李興華%楊華軍%週芳%繆雲根%雲濤%劉光清
왕단%BHASKAR Roy%리흥화%양화군%주방%무운근%운도%류광청
家蚕%Bac-to-Bac%表达系统%猪繁殖与呼吸综合征病毒%E蛋白%M蛋白
傢蠶%Bac-to-Bac%錶達繫統%豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒%E蛋白%M蛋白
가잠%Bac-to-Bac%표체계통%저번식여호흡종합정병독%E단백%M단백
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是一种严重危害养猪业的传染性病原.PRRSV病毒的E蛋白和M蛋白基因是开发PRRSV病毒新型疫苗的目标基因.利用杆状病毒Bac-to-Bac表达系统,将PRRSV病毒的E蛋白和M蛋白的基因亚克隆到杆状病毒转移载体pFastBacHTh中,获得重组转移质杜pFastBacHTb-E和pFastBacHTb-M,转化大肠杆菌Bm DH10 Bac感受态细胞,获得重组杆粒BmNPV Bacmid-E,BmNPV Bacmid-M,将这些重组杆粒转染家蚕培养细胞Bm5,获得重组病毒BmNPV-E和BmNPV-M.将2种重组病毒分别接种5龄起蚕,用 SDS-PAGE和Western blotting方法在重组Bacmid DNA转染的Bm5细胞和感染重组病毒的家蚕幼虫血细胞中分别检测到分子质量约20 kD和18 kD的E蛋白和M蛋白,表明PRRSV病毒的E蛋白和M蛋白在家蚕培养细胞及幼虫体内获得了表达,为利用家蚕-杆状病毒表达系统研制PRRSV的新型疫苗与诊断试奠莫定了基础.
豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒(PRRSV)是一種嚴重危害養豬業的傳染性病原.PRRSV病毒的E蛋白和M蛋白基因是開髮PRRSV病毒新型疫苗的目標基因.利用桿狀病毒Bac-to-Bac錶達繫統,將PRRSV病毒的E蛋白和M蛋白的基因亞剋隆到桿狀病毒轉移載體pFastBacHTh中,穫得重組轉移質杜pFastBacHTb-E和pFastBacHTb-M,轉化大腸桿菌Bm DH10 Bac感受態細胞,穫得重組桿粒BmNPV Bacmid-E,BmNPV Bacmid-M,將這些重組桿粒轉染傢蠶培養細胞Bm5,穫得重組病毒BmNPV-E和BmNPV-M.將2種重組病毒分彆接種5齡起蠶,用 SDS-PAGE和Western blotting方法在重組Bacmid DNA轉染的Bm5細胞和感染重組病毒的傢蠶幼蟲血細胞中分彆檢測到分子質量約20 kD和18 kD的E蛋白和M蛋白,錶明PRRSV病毒的E蛋白和M蛋白在傢蠶培養細胞及幼蟲體內穫得瞭錶達,為利用傢蠶-桿狀病毒錶達繫統研製PRRSV的新型疫苗與診斷試奠莫定瞭基礎.
저번식여호흡종합정병독(PRRSV)시일충엄중위해양저업적전염성병원.PRRSV병독적E단백화M단백기인시개발PRRSV병독신형역묘적목표기인.이용간상병독Bac-to-Bac표체계통,장PRRSV병독적E단백화M단백적기인아극륭도간상병독전이재체pFastBacHTh중,획득중조전이질두pFastBacHTb-E화pFastBacHTb-M,전화대장간균Bm DH10 Bac감수태세포,획득중조간립BmNPV Bacmid-E,BmNPV Bacmid-M,장저사중조간립전염가잠배양세포Bm5,획득중조병독BmNPV-E화BmNPV-M.장2충중조병독분별접충5령기잠,용 SDS-PAGE화Western blotting방법재중조Bacmid DNA전염적Bm5세포화감염중조병독적가잠유충혈세포중분별검측도분자질량약20 kD화18 kD적E단백화M단백,표명PRRSV병독적E단백화M단백재가잠배양세포급유충체내획득료표체,위이용가잠-간상병독표체계통연제PRRSV적신형역묘여진단시전막정료기출.
