复旦学报(医学版)
複旦學報(醫學版)
복단학보(의학판)
JOURNAL OF FUDAN UNIVERSITY
2003年
4期
313-316
,共4页
张宇清%侯敏%王霞%孙兴会%李平%朱运松
張宇清%侯敏%王霞%孫興會%李平%硃運鬆
장우청%후민%왕하%손흥회%리평%주운송
纤溶酶原激活剂抑制物2型%肿瘤坏死因子-α%细胞凋亡%突变体
纖溶酶原激活劑抑製物2型%腫瘤壞死因子-α%細胞凋亡%突變體
섬용매원격활제억제물2형%종류배사인자-α%세포조망%돌변체
目的研究纤溶酶原激活剂抑制物2型(PAI-2)的两种不同突变体抵抗肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导Hela细胞凋亡的活性差异,探讨PAI-2CD螺旋间区的空间构象对其抗凋亡功能的影响.方法分别构建突变体PAI-2D和PAI-2M真核表达质粒.转染Hela细胞,RT-PCR鉴定,筛选出能稳定表达PAI-2D和PAI-2M的阳性细胞株.用MTT法检测PAI-2的这两个突变体抗凋亡的活性,并利用计算机同源模建,比较PAI-2的这两个突变体空间构象的变化.结果突变体PAI-2M能抑制TNF-α诱导的Hela细胞凋亡,而PAI-2D则不能.PAI-2M较好地保持了野生型PAI-2的空间构象,而PAI-2DCD螺旋间区的空间构象则发生了较大的变化.结论 PAI-2抑制TNF-α诱导的细胞凋亡依赖于其CD螺旋间区空间构象的完整性,而与PENF结构域(PENF73-76)无关.
目的研究纖溶酶原激活劑抑製物2型(PAI-2)的兩種不同突變體牴抗腫瘤壞死因子-α(TNF-α)誘導Hela細胞凋亡的活性差異,探討PAI-2CD螺鏇間區的空間構象對其抗凋亡功能的影響.方法分彆構建突變體PAI-2D和PAI-2M真覈錶達質粒.轉染Hela細胞,RT-PCR鑒定,篩選齣能穩定錶達PAI-2D和PAI-2M的暘性細胞株.用MTT法檢測PAI-2的這兩箇突變體抗凋亡的活性,併利用計算機同源模建,比較PAI-2的這兩箇突變體空間構象的變化.結果突變體PAI-2M能抑製TNF-α誘導的Hela細胞凋亡,而PAI-2D則不能.PAI-2M較好地保持瞭野生型PAI-2的空間構象,而PAI-2DCD螺鏇間區的空間構象則髮生瞭較大的變化.結論 PAI-2抑製TNF-α誘導的細胞凋亡依賴于其CD螺鏇間區空間構象的完整性,而與PENF結構域(PENF73-76)無關.
목적연구섬용매원격활제억제물2형(PAI-2)적량충불동돌변체저항종류배사인자-α(TNF-α)유도Hela세포조망적활성차이,탐토PAI-2CD라선간구적공간구상대기항조망공능적영향.방법분별구건돌변체PAI-2D화PAI-2M진핵표체질립.전염Hela세포,RT-PCR감정,사선출능은정표체PAI-2D화PAI-2M적양성세포주.용MTT법검측PAI-2적저량개돌변체항조망적활성,병이용계산궤동원모건,비교PAI-2적저량개돌변체공간구상적변화.결과돌변체PAI-2M능억제TNF-α유도적Hela세포조망,이PAI-2D칙불능.PAI-2M교호지보지료야생형PAI-2적공간구상,이PAI-2DCD라선간구적공간구상칙발생료교대적변화.결론 PAI-2억제TNF-α유도적세포조망의뢰우기CD라선간구공간구상적완정성,이여PENF결구역(PENF73-76)무관.
