中山大学学报（自然科学版）
中山大學學報（自然科學版）
중산대학학보（자연과학판）
ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS SUNYATSENI
2006年
2期
64-67
,共4页
李瑞芳%张添元%罗进贤%王芳宇%顾取良%甘菁菁%肖凡
李瑞芳%張添元%囉進賢%王芳宇%顧取良%甘菁菁%肖凡
리서방%장첨원%라진현%왕방우%고취량%감정정%초범
嗜铬粒蛋白N区%枯草杆菌%抗真菌活性%活性区域
嗜鉻粒蛋白N區%枯草桿菌%抗真菌活性%活性區域
기락립단백N구%고초간균%항진균활성%활성구역
为寻找高效低毒的抗真菌药物,利用PCR技术扩增了编码人嗜铬粒蛋白N端18-76、18-66和31-76位氨基酸(CGA18-76、CGA18-66和CGA31-76)的DNA片段,将之克隆进枯草杆菌诱导型表达载体pSBPTQ,获得3种重组质粒pSC18-76、pSC18-66和pSC31-76,转化枯草杆菌DB1342.SDS-PAGE分析结果显示:经蔗糖诱导后,CGA18-76、CGA18-66和CGA31-76片段分别在枯草杆菌工程菌中获得表达,产物分泌到细胞外.表达量分别为5.6 mg/L、5.3 mg/L和5.6 mg/L.利用孔穴琼脂扩散法检测表达产物的抗真菌活性,并与CGA1-76进行比较,发现CGA18-76、CGA18-66和CGA31-76对烟曲霉菌、黄曲霉菌、石膏样小孢子菌和白念珠菌均有抑制作用,并以CGA31-76对白念珠菌的抑制作用为最强,CGA18-66对除白念珠菌之外的另3种测试真菌的抑制作用较强,而CGA18-76对测试真菌的抑制作用最弱.
為尋找高效低毒的抗真菌藥物,利用PCR技術擴增瞭編碼人嗜鉻粒蛋白N耑18-76、18-66和31-76位氨基痠(CGA18-76、CGA18-66和CGA31-76)的DNA片段,將之剋隆進枯草桿菌誘導型錶達載體pSBPTQ,穫得3種重組質粒pSC18-76、pSC18-66和pSC31-76,轉化枯草桿菌DB1342.SDS-PAGE分析結果顯示:經蔗糖誘導後,CGA18-76、CGA18-66和CGA31-76片段分彆在枯草桿菌工程菌中穫得錶達,產物分泌到細胞外.錶達量分彆為5.6 mg/L、5.3 mg/L和5.6 mg/L.利用孔穴瓊脂擴散法檢測錶達產物的抗真菌活性,併與CGA1-76進行比較,髮現CGA18-76、CGA18-66和CGA31-76對煙麯黴菌、黃麯黴菌、石膏樣小孢子菌和白唸珠菌均有抑製作用,併以CGA31-76對白唸珠菌的抑製作用為最彊,CGA18-66對除白唸珠菌之外的另3種測試真菌的抑製作用較彊,而CGA18-76對測試真菌的抑製作用最弱.
위심조고효저독적항진균약물,이용PCR기술확증료편마인기락립단백N단18-76、18-66화31-76위안기산(CGA18-76、CGA18-66화CGA31-76)적DNA편단,장지극륭진고초간균유도형표체재체pSBPTQ,획득3충중조질립pSC18-76、pSC18-66화pSC31-76,전화고초간균DB1342.SDS-PAGE분석결과현시:경자당유도후,CGA18-76、CGA18-66화CGA31-76편단분별재고초간균공정균중획득표체,산물분비도세포외.표체량분별위5.6 mg/L、5.3 mg/L화5.6 mg/L.이용공혈경지확산법검측표체산물적항진균활성,병여CGA1-76진행비교,발현CGA18-76、CGA18-66화CGA31-76대연곡매균、황곡매균、석고양소포자균화백념주균균유억제작용,병이CGA31-76대백념주균적억제작용위최강,CGA18-66대제백념주균지외적령3충측시진균적억제작용교강,이CGA18-76대측시진균적억제작용최약.
