中国临床康复
中國臨床康複
중국림상강복
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATION
2006年
38期
71-75
,共5页
刘巧凤%金清华%姜海英%崔桂玉%孙嘉斌%金秀吉
劉巧鳳%金清華%薑海英%崔桂玉%孫嘉斌%金秀吉
류교봉%금청화%강해영%최계옥%손가빈%금수길
海马齿状回%氨基酸%微量透析%长时程增强%学习%记忆%清醒大鼠
海馬齒狀迴%氨基痠%微量透析%長時程增彊%學習%記憶%清醒大鼠
해마치상회%안기산%미량투석%장시정증강%학습%기억%청성대서
目的:观察条件反射的建立、巩固和消退过程中,自由活动大鼠海马齿状回细胞外液中天冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸和牛磺酸的浓度变化,探讨其与突触效应长时程增强和学习记忆之间的内在联系.方法:实验于2005-03/10在延边大学生理学教研室完成.选用3月龄Wistar系雄性大鼠40只,随机数字表法分成5组,对照组、实验1a组、实验1b组、实验2组和实验3组,每组8只.实验1a组经训练建立条件反射,达学会标准后进行实验性消退;实验1b组建立条件反射的方法同1a组,每次训练前2 min内用微量注射器往齿状回区注射90 μmol/L N-甲基-D-门冬氨酸受体阻断剂MK-801 1 μL;实验2组经训练建立条件反射,达学会标准后观察其自然消退情况;实验3组经训练建立条件反射,达学会标准后继续巩固训练2 d,观察其自然消退情况;对照组不配对给予条件刺激与非条件刺激,不形成条件反射.以红灯为条件刺激、脚掌电刺激为非条件刺激来形成条件反射.大鼠在信号出现期上平台为正确反应.实验训练20次/d,以连续测试10次中有9次出现正确反应定为学会标准,只有1次定为行为消退标准.应用脑部微量透析法、高效液相色谱法、慢性埋植电极法以及电生理记录法等实验技术观察海马齿状回区几种氨基酸的浓度变化,同时以群体峰电位作为指标观察突触效应的变化.结果:各组动物无死亡,插入透析探针位置正确者进入结果分析.①对照组大鼠训练后,群体峰电位和天冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、牛磺酸浓度均无明显变化(P>0.05).②条件反射建立过程中,实验la组、2组和3组的大鼠海马齿状回区群体峰电位和细胞外液中谷氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸和牛磺酸浓度均明显升高.③实验1a组大鼠经两三天的实验性消退后,群体峰电位峰值和海马齿状回区细胞外液中天冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、牛磺酸的浓度均下降到开始训练前水平,与消退前比较差异有显著性(P<0.01).实验2组大鼠经四五天自然消退后,群体峰电位峰值和海马齿状回区细胞外液中谷氨酸、谷氨酰胺的浓度下降到开始训练前水平,与消退前比较差异有显著性(P<0.01).实验3组大鼠巩固性训练两天后,群体峰电位峰值和海马齿状回区谷氨酸、谷氨酰胺分别比开始训练前明显增加(P<0.001、P<0.01),但与达学会标准后比较差异无显著性意义(P>0.05).停止训练后需7天才有自然消退,此时的群体峰电位峰值和海马齿状回区细胞外液中谷氨酸、谷氨酰胺的浓度也基本恢复到开始训练前水平.④大鼠训练后立即检测的齿状回区谷氨酸浓度无明显变化,其后逐渐升高,至24 h达最高水平.⑤实验1a组在条件性回避反射的建立和实验性消退中,齿状回区谷氨酸浓度、群体峰电位峰值和行为正确反应率的变化基本同步吻合.⑥实验1b组每实验日训练前注射MK-801后,需8个实验日的(140.5±11.6)次训练才达学会标准,与正常对照组只需(75.1±8.8)次相比差异有极显著性意义(P<0.01).结论:条件反射建立的过程中,谷氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、牛磺酸浓度明显增加,而随着条件反射消退,又逐渐回降,和齿状回区群体峰电位峰值以及行为正确反应率的变化呈正相关;1个实验日训练作业结束后谷氨酸浓度逐渐升高,在第24小时达最高水平,说明在行为训练中谷氨酸的渐进性增多与习得性长时程增强的形成相关;齿状回区注射N-甲基-D-天冬氨酸受体阻断剂后,大鼠条件反射建立受显著抑制.提示谷氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、牛磺酸可能是习得性长时程增强和学习记忆的神经物质基础.
目的:觀察條件反射的建立、鞏固和消退過程中,自由活動大鼠海馬齒狀迴細胞外液中天鼕氨痠、穀氨痠、穀氨酰胺、甘氨痠和牛磺痠的濃度變化,探討其與突觸效應長時程增彊和學習記憶之間的內在聯繫.方法:實驗于2005-03/10在延邊大學生理學教研室完成.選用3月齡Wistar繫雄性大鼠40隻,隨機數字錶法分成5組,對照組、實驗1a組、實驗1b組、實驗2組和實驗3組,每組8隻.實驗1a組經訓練建立條件反射,達學會標準後進行實驗性消退;實驗1b組建立條件反射的方法同1a組,每次訓練前2 min內用微量註射器往齒狀迴區註射90 μmol/L N-甲基-D-門鼕氨痠受體阻斷劑MK-801 1 μL;實驗2組經訓練建立條件反射,達學會標準後觀察其自然消退情況;實驗3組經訓練建立條件反射,達學會標準後繼續鞏固訓練2 d,觀察其自然消退情況;對照組不配對給予條件刺激與非條件刺激,不形成條件反射.以紅燈為條件刺激、腳掌電刺激為非條件刺激來形成條件反射.大鼠在信號齣現期上平檯為正確反應.實驗訓練20次/d,以連續測試10次中有9次齣現正確反應定為學會標準,隻有1次定為行為消退標準.應用腦部微量透析法、高效液相色譜法、慢性埋植電極法以及電生理記錄法等實驗技術觀察海馬齒狀迴區幾種氨基痠的濃度變化,同時以群體峰電位作為指標觀察突觸效應的變化.結果:各組動物無死亡,插入透析探針位置正確者進入結果分析.①對照組大鼠訓練後,群體峰電位和天鼕氨痠、穀氨痠、穀氨酰胺、甘氨痠、牛磺痠濃度均無明顯變化(P>0.05).②條件反射建立過程中,實驗la組、2組和3組的大鼠海馬齒狀迴區群體峰電位和細胞外液中穀氨痠、穀氨酰胺、天鼕氨痠和牛磺痠濃度均明顯升高.③實驗1a組大鼠經兩三天的實驗性消退後,群體峰電位峰值和海馬齒狀迴區細胞外液中天鼕氨痠、穀氨痠、穀氨酰胺、牛磺痠的濃度均下降到開始訓練前水平,與消退前比較差異有顯著性(P<0.01).實驗2組大鼠經四五天自然消退後,群體峰電位峰值和海馬齒狀迴區細胞外液中穀氨痠、穀氨酰胺的濃度下降到開始訓練前水平,與消退前比較差異有顯著性(P<0.01).實驗3組大鼠鞏固性訓練兩天後,群體峰電位峰值和海馬齒狀迴區穀氨痠、穀氨酰胺分彆比開始訓練前明顯增加(P<0.001、P<0.01),但與達學會標準後比較差異無顯著性意義(P>0.05).停止訓練後需7天纔有自然消退,此時的群體峰電位峰值和海馬齒狀迴區細胞外液中穀氨痠、穀氨酰胺的濃度也基本恢複到開始訓練前水平.④大鼠訓練後立即檢測的齒狀迴區穀氨痠濃度無明顯變化,其後逐漸升高,至24 h達最高水平.⑤實驗1a組在條件性迴避反射的建立和實驗性消退中,齒狀迴區穀氨痠濃度、群體峰電位峰值和行為正確反應率的變化基本同步吻閤.⑥實驗1b組每實驗日訓練前註射MK-801後,需8箇實驗日的(140.5±11.6)次訓練纔達學會標準,與正常對照組隻需(75.1±8.8)次相比差異有極顯著性意義(P<0.01).結論:條件反射建立的過程中,穀氨痠、穀氨酰胺、天鼕氨痠、牛磺痠濃度明顯增加,而隨著條件反射消退,又逐漸迴降,和齒狀迴區群體峰電位峰值以及行為正確反應率的變化呈正相關;1箇實驗日訓練作業結束後穀氨痠濃度逐漸升高,在第24小時達最高水平,說明在行為訓練中穀氨痠的漸進性增多與習得性長時程增彊的形成相關;齒狀迴區註射N-甲基-D-天鼕氨痠受體阻斷劑後,大鼠條件反射建立受顯著抑製.提示穀氨痠、穀氨酰胺、天鼕氨痠、牛磺痠可能是習得性長時程增彊和學習記憶的神經物質基礎.
목적:관찰조건반사적건립、공고화소퇴과정중,자유활동대서해마치상회세포외액중천동안산、곡안산、곡안선알、감안산화우광산적농도변화,탐토기여돌촉효응장시정증강화학습기억지간적내재련계.방법:실험우2005-03/10재연변대학생이학교연실완성.선용3월령Wistar계웅성대서40지,수궤수자표법분성5조,대조조、실험1a조、실험1b조、실험2조화실험3조,매조8지.실험1a조경훈련건립조건반사,체학회표준후진행실험성소퇴;실험1b조건립조건반사적방법동1a조,매차훈련전2 min내용미량주사기왕치상회구주사90 μmol/L N-갑기-D-문동안산수체조단제MK-801 1 μL;실험2조경훈련건립조건반사,체학회표준후관찰기자연소퇴정황;실험3조경훈련건립조건반사,체학회표준후계속공고훈련2 d,관찰기자연소퇴정황;대조조불배대급여조건자격여비조건자격,불형성조건반사.이홍등위조건자격、각장전자격위비조건자격래형성조건반사.대서재신호출현기상평태위정학반응.실험훈련20차/d,이련속측시10차중유9차출현정학반응정위학회표준,지유1차정위행위소퇴표준.응용뇌부미량투석법、고효액상색보법、만성매식전겁법이급전생리기록법등실험기술관찰해마치상회구궤충안기산적농도변화,동시이군체봉전위작위지표관찰돌촉효응적변화.결과:각조동물무사망,삽입투석탐침위치정학자진입결과분석.①대조조대서훈련후,군체봉전위화천동안산、곡안산、곡안선알、감안산、우광산농도균무명현변화(P>0.05).②조건반사건립과정중,실험la조、2조화3조적대서해마치상회구군체봉전위화세포외액중곡안산、곡안선알、천동안산화우광산농도균명현승고.③실험1a조대서경량삼천적실험성소퇴후,군체봉전위봉치화해마치상회구세포외액중천동안산、곡안산、곡안선알、우광산적농도균하강도개시훈련전수평,여소퇴전비교차이유현저성(P<0.01).실험2조대서경사오천자연소퇴후,군체봉전위봉치화해마치상회구세포외액중곡안산、곡안선알적농도하강도개시훈련전수평,여소퇴전비교차이유현저성(P<0.01).실험3조대서공고성훈련량천후,군체봉전위봉치화해마치상회구곡안산、곡안선알분별비개시훈련전명현증가(P<0.001、P<0.01),단여체학회표준후비교차이무현저성의의(P>0.05).정지훈련후수7천재유자연소퇴,차시적군체봉전위봉치화해마치상회구세포외액중곡안산、곡안선알적농도야기본회복도개시훈련전수평.④대서훈련후립즉검측적치상회구곡안산농도무명현변화,기후축점승고,지24 h체최고수평.⑤실험1a조재조건성회피반사적건립화실험성소퇴중,치상회구곡안산농도、군체봉전위봉치화행위정학반응솔적변화기본동보문합.⑥실험1b조매실험일훈련전주사MK-801후,수8개실험일적(140.5±11.6)차훈련재체학회표준,여정상대조조지수(75.1±8.8)차상비차이유겁현저성의의(P<0.01).결론:조건반사건립적과정중,곡안산、곡안선알、천동안산、우광산농도명현증가,이수착조건반사소퇴,우축점회강,화치상회구군체봉전위봉치이급행위정학반응솔적변화정정상관;1개실험일훈련작업결속후곡안산농도축점승고,재제24소시체최고수평,설명재행위훈련중곡안산적점진성증다여습득성장시정증강적형성상관;치상회구주사N-갑기-D-천동안산수체조단제후,대서조건반사건립수현저억제.제시곡안산、곡안선알、천동안산、우광산가능시습득성장시정증강화학습기억적신경물질기출.