细胞生物学杂志
細胞生物學雜誌
세포생물학잡지
CHINESE JOURNAL OF CELL BIOLOGY
2008年
1期
82-88
,共7页
姜华军%张春%常莹%朱忠华%刘建社%邓安国
薑華軍%張春%常瑩%硃忠華%劉建社%鄧安國
강화군%장춘%상형%주충화%류건사%산안국
足细胞%分化%足细胞相关蛋白%细胞骨架%CD2相关蛋白
足細胞%分化%足細胞相關蛋白%細胞骨架%CD2相關蛋白
족세포%분화%족세포상관단백%세포골가%CD2상관단백
体外33℃许可条件下培乔由H-2Kb-tsA58转基因小鼠所建立的禾分化足细肥系,开在37℃非许可条件下诱导其分化.观察足细胞分化后形态学改变;MTT法测定细胞的生长曲线;红色荧光染料PKH-26标记足细胞,追踪其在子代细胞中的分布,检测细胞增殖能力;流式细胞仪检测细胞周期的改变;Western印迹检测足细胞相关蛋白CD2AP、α-actinin和足细胞分化相关蛋白nephrin的表达;免疫荧光结合激光共聚焦方法检测CD2AP、nephrin,α-actinin、F-肌动蛋白和微管蛋白的表达变化.结果显示:与未分化足细胞相比,分化足细胞形态发生改变,生长速度减慢,增殖能力下降:细胞周期表现为G0/G1期细胞比例的增多和S期及G2/M期的细胞比例下降;CD2AP、neDhrin和α-actinin的表达明显增高;CD2AP、nephrin、α-actinin、F-肌动蛋白和微管蛋白在表达分布上均发生明显的改变.以上结果表明,足细胞分化后生物学性状明显发生改变,细胞骨架重新分布:CD2AP、nephrin、α-actinin、F-肌动蛋白和微管蛋白均在足细胞的分化过程中发挥重要作用.
體外33℃許可條件下培喬由H-2Kb-tsA58轉基因小鼠所建立的禾分化足細肥繫,開在37℃非許可條件下誘導其分化.觀察足細胞分化後形態學改變;MTT法測定細胞的生長麯線;紅色熒光染料PKH-26標記足細胞,追蹤其在子代細胞中的分佈,檢測細胞增殖能力;流式細胞儀檢測細胞週期的改變;Western印跡檢測足細胞相關蛋白CD2AP、α-actinin和足細胞分化相關蛋白nephrin的錶達;免疫熒光結閤激光共聚焦方法檢測CD2AP、nephrin,α-actinin、F-肌動蛋白和微管蛋白的錶達變化.結果顯示:與未分化足細胞相比,分化足細胞形態髮生改變,生長速度減慢,增殖能力下降:細胞週期錶現為G0/G1期細胞比例的增多和S期及G2/M期的細胞比例下降;CD2AP、neDhrin和α-actinin的錶達明顯增高;CD2AP、nephrin、α-actinin、F-肌動蛋白和微管蛋白在錶達分佈上均髮生明顯的改變.以上結果錶明,足細胞分化後生物學性狀明顯髮生改變,細胞骨架重新分佈:CD2AP、nephrin、α-actinin、F-肌動蛋白和微管蛋白均在足細胞的分化過程中髮揮重要作用.
체외33℃허가조건하배교유H-2Kb-tsA58전기인소서소건립적화분화족세비계,개재37℃비허가조건하유도기분화.관찰족세포분화후형태학개변;MTT법측정세포적생장곡선;홍색형광염료PKH-26표기족세포,추종기재자대세포중적분포,검측세포증식능력;류식세포의검측세포주기적개변;Western인적검측족세포상관단백CD2AP、α-actinin화족세포분화상관단백nephrin적표체;면역형광결합격광공취초방법검측CD2AP、nephrin,α-actinin、F-기동단백화미관단백적표체변화.결과현시:여미분화족세포상비,분화족세포형태발생개변,생장속도감만,증식능력하강:세포주기표현위G0/G1기세포비례적증다화S기급G2/M기적세포비례하강;CD2AP、neDhrin화α-actinin적표체명현증고;CD2AP、nephrin、α-actinin、F-기동단백화미관단백재표체분포상균발생명현적개변.이상결과표명,족세포분화후생물학성상명현발생개변,세포골가중신분포:CD2AP、nephrin、α-actinin、F-기동단백화미관단백균재족세포적분화과정중발휘중요작용.
