复旦学报（医学版）
複旦學報（醫學版）
복단학보（의학판）
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2008年
5期
697-701
,共5页
高波%段志坚%高震%洪晓武%徐薇%熊思东
高波%段誌堅%高震%洪曉武%徐薇%熊思東
고파%단지견%고진%홍효무%서미%웅사동
TRIM22%多肽抗体%免疫亲和层析%Western blot%间接免疫荧光
TRIM22%多肽抗體%免疫親和層析%Western blot%間接免疫熒光
TRIM22%다태항체%면역친화층석%Western blot%간접면역형광
目的 制备抗TRIM22多肽抗体及鉴定其性能.方法 将TRIM22 N端15个氨基酸的多肽(MDFSVKVDIEKEVTC)与钥孔嘁血蓝蛋白(KLH)偶联.免疫新西兰白兔制备抗血清;将TRIM22多肽与Affi-Gel 10偶联制备免疫亲和层析柱,兔抗血清经亲和层析纯化后得到TRIM22多肽特异性抗体;采用ELISA测定抗体效价、Western blot鉴定抗体特异性,并利用该抗体通过间接免疫荧光实验来检测TRIM22蛋白的细胞内定位.结果 获得了抗TRIM22特异性抗体.Western blot结果显示该抗体能特异识别真核及原核表达的TRIM22蛋白.利用该抗体进行的间接免疫荧光实验发现TRIM22蛋白主要定位在HepG2细胞核中.结论 该抗体的制备为TRIM22分子的功能研究提供了有力的工具.
目的 製備抗TRIM22多肽抗體及鑒定其性能.方法 將TRIM22 N耑15箇氨基痠的多肽(MDFSVKVDIEKEVTC)與鑰孔嘁血藍蛋白(KLH)偶聯.免疫新西蘭白兔製備抗血清;將TRIM22多肽與Affi-Gel 10偶聯製備免疫親和層析柱,兔抗血清經親和層析純化後得到TRIM22多肽特異性抗體;採用ELISA測定抗體效價、Western blot鑒定抗體特異性,併利用該抗體通過間接免疫熒光實驗來檢測TRIM22蛋白的細胞內定位.結果 穫得瞭抗TRIM22特異性抗體.Western blot結果顯示該抗體能特異識彆真覈及原覈錶達的TRIM22蛋白.利用該抗體進行的間接免疫熒光實驗髮現TRIM22蛋白主要定位在HepG2細胞覈中.結論 該抗體的製備為TRIM22分子的功能研究提供瞭有力的工具.
목적 제비항TRIM22다태항체급감정기성능.방법 장TRIM22 N단15개안기산적다태(MDFSVKVDIEKEVTC)여약공잡혈람단백(KLH)우련.면역신서란백토제비항혈청;장TRIM22다태여Affi-Gel 10우련제비면역친화층석주,토항혈청경친화층석순화후득도TRIM22다태특이성항체;채용ELISA측정항체효개、Western blot감정항체특이성,병이용해항체통과간접면역형광실험래검측TRIM22단백적세포내정위.결과 획득료항TRIM22특이성항체.Western blot결과현시해항체능특이식별진핵급원핵표체적TRIM22단백.이용해항체진행적간접면역형광실험발현TRIM22단백주요정위재HepG2세포핵중.결론 해항체적제비위TRIM22분자적공능연구제공료유력적공구.
