中国微生态学杂志
中國微生態學雜誌
중국미생태학잡지
CHINESE JOURNAL OF MICROECOLOGY
2008年
5期
472-474
,共3页
肖代雯%杨永长%喻华%刘华%黄文芳%黄波%胡琦%廖维金
肖代雯%楊永長%喻華%劉華%黃文芳%黃波%鬍琦%廖維金
초대문%양영장%유화%류화%황문방%황파%호기%료유금
大肠埃希菌%蛋白指纹%表面增强激光解析电离飞行时间质谱
大腸埃希菌%蛋白指紋%錶麵增彊激光解析電離飛行時間質譜
대장애희균%단백지문%표면증강격광해석전리비행시간질보
目的 建立大肠埃希菌(Escherichia coli,E.coli)蛋白指纹图谱,为E.coli感染快速诊断奠定基础.方法 收集临床分离E.coli 88株,提取细菌DNA,PCR检测E.coli 16S rRNA.蛋白提取液提取细菌蛋白,干化学法测蛋白浓度,应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)检测E.coli蛋白,采用Ciphergen Proteinchip软件自动采集数据.重复测定20次E.coli混合标本,评价SELDI检测E.coli蛋白分子量的重复性.结果 E.coli标准菌株ATCC 25922和临床分离株均可检出16S rRNA.AU芯片能捕获近30个E.coli蛋白峰,其中19个蛋白峰构成E.coli特征性蛋白指纹图谱,各蛋白峰在临床分离E.coli间分子量变异系数≤0.2%.SELDI重复检测20次E.coli混合标本显示同一蛋白峰的分子量变异系数≤0.05%.结论 E.coli在分子量3～20 kD范围内具有特征性蛋白指纹图谱,为快速诊断E.coli感染提供了新思路.
目的 建立大腸埃希菌(Escherichia coli,E.coli)蛋白指紋圖譜,為E.coli感染快速診斷奠定基礎.方法 收集臨床分離E.coli 88株,提取細菌DNA,PCR檢測E.coli 16S rRNA.蛋白提取液提取細菌蛋白,榦化學法測蛋白濃度,應用錶麵增彊激光解析電離飛行時間質譜技術(SELDI-TOF-MS)檢測E.coli蛋白,採用Ciphergen Proteinchip軟件自動採集數據.重複測定20次E.coli混閤標本,評價SELDI檢測E.coli蛋白分子量的重複性.結果 E.coli標準菌株ATCC 25922和臨床分離株均可檢齣16S rRNA.AU芯片能捕穫近30箇E.coli蛋白峰,其中19箇蛋白峰構成E.coli特徵性蛋白指紋圖譜,各蛋白峰在臨床分離E.coli間分子量變異繫數≤0.2%.SELDI重複檢測20次E.coli混閤標本顯示同一蛋白峰的分子量變異繫數≤0.05%.結論 E.coli在分子量3～20 kD範圍內具有特徵性蛋白指紋圖譜,為快速診斷E.coli感染提供瞭新思路.
목적 건립대장애희균(Escherichia coli,E.coli)단백지문도보,위E.coli감염쾌속진단전정기출.방법 수집림상분리E.coli 88주,제취세균DNA,PCR검측E.coli 16S rRNA.단백제취액제취세균단백,간화학법측단백농도,응용표면증강격광해석전리비행시간질보기술(SELDI-TOF-MS)검측E.coli단백,채용Ciphergen Proteinchip연건자동채집수거.중복측정20차E.coli혼합표본,평개SELDI검측E.coli단백분자량적중복성.결과 E.coli표준균주ATCC 25922화림상분리주균가검출16S rRNA.AU심편능포획근30개E.coli단백봉,기중19개단백봉구성E.coli특정성단백지문도보,각단백봉재림상분리E.coli간분자량변이계수≤0.2%.SELDI중복검측20차E.coli혼합표본현시동일단백봉적분자량변이계수≤0.05%.결론 E.coli재분자량3～20 kD범위내구유특정성단백지문도보,위쾌속진단E.coli감염제공료신사로.
