中国脊柱脊髓杂志
中國脊柱脊髓雜誌
중국척주척수잡지
CHINESE JOURNAL OF SPINE AND SPINAL CORD
2009年
5期
381-387
,共7页
邵建树%吴小涛%王运涛%曹烨%严慧深
邵建樹%吳小濤%王運濤%曹燁%嚴慧深
소건수%오소도%왕운도%조엽%엄혜심
骨髓间充质干细胞%髓核细胞%共培养%营养效应%类髓核分化效应%兔
骨髓間充質榦細胞%髓覈細胞%共培養%營養效應%類髓覈分化效應%兔
골수간충질간세포%수핵세포%공배양%영양효응%류수핵분화효응%토
目的:探讨兔骨髓间充质于细胞(BMMSCs)与髓核细胞(NPCs)共培养时BMMSCs的营养效应和类髓核分化效应及其动态变化规律.方法:应用1月龄新西兰大白兔的骨髓和髓核进行BMMSCs及NPCs的分离培养与鉴定,建立3个细胞培养组,BMMSCs与NPCs共培养组(实验组),BMMSCs单独培养组和NPCs单独培养组作为对照组.在培养的不同时间点(3、6、9、12、15、18、21d)分别检测细胞培养上清液中转化生长因子β1(TGFβ1)、血小板衍化生长因子(PDGF)的含量变化及BMMSCs与NPCs的增殖能力,采用RT-PCR法检测培养不同时间点BMMSCs与NPCs的蛋白聚糖Aggrecan及Ⅱ型胶原蛋白mRNA的表达变化.结果:分离培养的两种细胞经鉴定分别为BMMSCs及NPCs.从第3天开始的各个时间点,实验组上清液中TGFβ1、PDGF的含量较两对照组明显增高(P<0.05),且随时间的延长而逐渐增高,第15天达最高,TGFβ1、PDGF分别达815.81±25.69pg/ml和494.28±20.01pg/ml,此后第18d、21d逐渐下降.实验组细胞DNA含量在各个时间点上均较两对照组明显升高(P<0.05).从第3天开始的各个时间点,实验组NPCs的蛋白聚糖Aggrecan及Ⅱ型胶原mRNA的表达较对照组高(P<0.05);同时从第15天开始至第21天,实验组BMMSCs的蛋白聚糖Aggrecan及Ⅱ型胶原mRNA的表达较对照组高(P<0.05).结论:BMMSCs与NPCs共培养时BMMSCs可通过表达TGFβ1、PDGF等细胞因子发挥其营养效应,激活NPCs.促进其增殖及细胞外基质的合成;在共培养后期,BMMSCs在髓核局部微环境下,可发挥其类髓核分化效应,开始合成蛋白聚糖Aggrecan及Ⅱ型胶原蛋白.
目的:探討兔骨髓間充質于細胞(BMMSCs)與髓覈細胞(NPCs)共培養時BMMSCs的營養效應和類髓覈分化效應及其動態變化規律.方法:應用1月齡新西蘭大白兔的骨髓和髓覈進行BMMSCs及NPCs的分離培養與鑒定,建立3箇細胞培養組,BMMSCs與NPCs共培養組(實驗組),BMMSCs單獨培養組和NPCs單獨培養組作為對照組.在培養的不同時間點(3、6、9、12、15、18、21d)分彆檢測細胞培養上清液中轉化生長因子β1(TGFβ1)、血小闆衍化生長因子(PDGF)的含量變化及BMMSCs與NPCs的增殖能力,採用RT-PCR法檢測培養不同時間點BMMSCs與NPCs的蛋白聚糖Aggrecan及Ⅱ型膠原蛋白mRNA的錶達變化.結果:分離培養的兩種細胞經鑒定分彆為BMMSCs及NPCs.從第3天開始的各箇時間點,實驗組上清液中TGFβ1、PDGF的含量較兩對照組明顯增高(P<0.05),且隨時間的延長而逐漸增高,第15天達最高,TGFβ1、PDGF分彆達815.81±25.69pg/ml和494.28±20.01pg/ml,此後第18d、21d逐漸下降.實驗組細胞DNA含量在各箇時間點上均較兩對照組明顯升高(P<0.05).從第3天開始的各箇時間點,實驗組NPCs的蛋白聚糖Aggrecan及Ⅱ型膠原mRNA的錶達較對照組高(P<0.05);同時從第15天開始至第21天,實驗組BMMSCs的蛋白聚糖Aggrecan及Ⅱ型膠原mRNA的錶達較對照組高(P<0.05).結論:BMMSCs與NPCs共培養時BMMSCs可通過錶達TGFβ1、PDGF等細胞因子髮揮其營養效應,激活NPCs.促進其增殖及細胞外基質的閤成;在共培養後期,BMMSCs在髓覈跼部微環境下,可髮揮其類髓覈分化效應,開始閤成蛋白聚糖Aggrecan及Ⅱ型膠原蛋白.
목적:탐토토골수간충질우세포(BMMSCs)여수핵세포(NPCs)공배양시BMMSCs적영양효응화류수핵분화효응급기동태변화규률.방법:응용1월령신서란대백토적골수화수핵진행BMMSCs급NPCs적분리배양여감정,건립3개세포배양조,BMMSCs여NPCs공배양조(실험조),BMMSCs단독배양조화NPCs단독배양조작위대조조.재배양적불동시간점(3、6、9、12、15、18、21d)분별검측세포배양상청액중전화생장인자β1(TGFβ1)、혈소판연화생장인자(PDGF)적함량변화급BMMSCs여NPCs적증식능력,채용RT-PCR법검측배양불동시간점BMMSCs여NPCs적단백취당Aggrecan급Ⅱ형효원단백mRNA적표체변화.결과:분리배양적량충세포경감정분별위BMMSCs급NPCs.종제3천개시적각개시간점,실험조상청액중TGFβ1、PDGF적함량교량대조조명현증고(P<0.05),차수시간적연장이축점증고,제15천체최고,TGFβ1、PDGF분별체815.81±25.69pg/ml화494.28±20.01pg/ml,차후제18d、21d축점하강.실험조세포DNA함량재각개시간점상균교량대조조명현승고(P<0.05).종제3천개시적각개시간점,실험조NPCs적단백취당Aggrecan급Ⅱ형효원mRNA적표체교대조조고(P<0.05);동시종제15천개시지제21천,실험조BMMSCs적단백취당Aggrecan급Ⅱ형효원mRNA적표체교대조조고(P<0.05).결론:BMMSCs여NPCs공배양시BMMSCs가통과표체TGFβ1、PDGF등세포인자발휘기영양효응,격활NPCs.촉진기증식급세포외기질적합성;재공배양후기,BMMSCs재수핵국부미배경하,가발휘기류수핵분화효응,개시합성단백취당Aggrecan급Ⅱ형효원단백.
