郑州大学学报(医学版)
鄭州大學學報(醫學版)
정주대학학보(의학판)
JOURNAL OF ZHENGZHOU UNIVERISTY(MEDICAL SCIENCES)
2011年
1期
7-9
,共3页
郭三星%侯桂琴%李杰%张艳%贝维娟%薛乐勋
郭三星%侯桂琴%李傑%張豔%貝維娟%薛樂勛
곽삼성%후계금%리걸%장염%패유연%설악훈
食管肿瘤%EC9706%哺乳动物雷帕霉素靶蛋白%核糖体40s小亚基S6蛋白激酶%短发夹RNA
食管腫瘤%EC9706%哺乳動物雷帕黴素靶蛋白%覈糖體40s小亞基S6蛋白激酶%短髮夾RNA
식관종류%EC9706%포유동물뢰파매소파단백%핵당체40s소아기S6단백격매%단발협RNA
目的:观察核糖体40 s小亚基S6蛋白激酶(p70S6K)特异性短发夹RNA(shRNA)对EC9706细胞p70S6K表达的影响.方法:根据GenBank p70S6K的mRNA序列,设计并合成p70S6K特异性的shRNA序列,退火形成双链后插入pSIREN-RetroQ-DsRed-Express载体,构建表达载体pshRNA-p70S6K,转染EC9706细胞.采用RT-PCR和Western blot方法分别检测转染24、48、72、96及120 h后细胞中p70S6K mRNA和磷酸化p70S6K的表达,设未转染的EC9706细胞为对照.结果:各组细胞p70S6K mRNA和磷酸化p70S6K蛋白的表达差异有统计学意义(F=106.343,721.632,P均＜0.001).转染细胞p70S6K mRNA的表达在转染24、48和72 h后均较对照组下降(P＜0.05),在第48 h表达最低;磷酸化p70S6K蛋白的表达在转染24、48、72和96 h后均较对照组下降(P＜0.05),第48 h表达最低.结论:p70S6K特异性shRNA能够下调EC9706细胞中p70S6K mRNA和蛋白的表达.
目的:觀察覈糖體40 s小亞基S6蛋白激酶(p70S6K)特異性短髮夾RNA(shRNA)對EC9706細胞p70S6K錶達的影響.方法:根據GenBank p70S6K的mRNA序列,設計併閤成p70S6K特異性的shRNA序列,退火形成雙鏈後插入pSIREN-RetroQ-DsRed-Express載體,構建錶達載體pshRNA-p70S6K,轉染EC9706細胞.採用RT-PCR和Western blot方法分彆檢測轉染24、48、72、96及120 h後細胞中p70S6K mRNA和燐痠化p70S6K的錶達,設未轉染的EC9706細胞為對照.結果:各組細胞p70S6K mRNA和燐痠化p70S6K蛋白的錶達差異有統計學意義(F=106.343,721.632,P均＜0.001).轉染細胞p70S6K mRNA的錶達在轉染24、48和72 h後均較對照組下降(P＜0.05),在第48 h錶達最低;燐痠化p70S6K蛋白的錶達在轉染24、48、72和96 h後均較對照組下降(P＜0.05),第48 h錶達最低.結論:p70S6K特異性shRNA能夠下調EC9706細胞中p70S6K mRNA和蛋白的錶達.
목적:관찰핵당체40 s소아기S6단백격매(p70S6K)특이성단발협RNA(shRNA)대EC9706세포p70S6K표체적영향.방법:근거GenBank p70S6K적mRNA서렬,설계병합성p70S6K특이성적shRNA서렬,퇴화형성쌍련후삽입pSIREN-RetroQ-DsRed-Express재체,구건표체재체pshRNA-p70S6K,전염EC9706세포.채용RT-PCR화Western blot방법분별검측전염24、48、72、96급120 h후세포중p70S6K mRNA화린산화p70S6K적표체,설미전염적EC9706세포위대조.결과:각조세포p70S6K mRNA화린산화p70S6K단백적표체차이유통계학의의(F=106.343,721.632,P균＜0.001).전염세포p70S6K mRNA적표체재전염24、48화72 h후균교대조조하강(P＜0.05),재제48 h표체최저;린산화p70S6K단백적표체재전염24、48、72화96 h후균교대조조하강(P＜0.05),제48 h표체최저.결론:p70S6K특이성shRNA능구하조EC9706세포중p70S6K mRNA화단백적표체.
