CAJ | 학술논문

本研究旨在阐明鸡氨肽酶N(chAPN)、唾液酸以及硫酸乙酰肝素在传染性支气管炎病毒(IBV)M41株感染宿主细胞中的作用以及3种受体特异抑制剂对IBV M41株在自然宿主CEK细胞内增殖能力的影响.作者选择苯丁抑制素(Bestatin)、神经氨酸酶(NA)和肝素酶Ⅲ分别作为APN、唾液酸以及硫酸乙酰肝素的抑制剂,在不同条件下,单独或共同预处理CEK细胞,而后接入IBV M41株病毒感染细胞,应用荧光定量PCR方法定量检测IBVM41株在CEK细胞中的增殖变化,应用鸡胚半数感染剂量法(EID50)测定病毒感染鸡胚能力的变化.结果表明,经Bestatin和NA处理的CEK细胞获得了抵抗IBV M41株感染的能力,与未经处理的(对照组)细胞相比,Bestatin和NA能显著降低IBV M41株在CEK细胞内的增殖及对鸡胚的感染能力(P＜0.01),且Bestatin处理后CEK细胞内的病毒增殖量显著低于NA处理后CEK细胞内的病毒增殖量,两者病毒液的EID50滴定值差异显著(P＜0.01);肝素酶Ⅲ的处理则对病毒增殖无显著影响;3种受体抑制剂共同处理CEK细胞后,病毒增殖量显著下降(P＜0.01),但仍有病毒增殖,病毒液的EID50滴定值为102.12±0.05·0.1 mL-1.结果提示,chAPN在IBV感染宿主细胞的过程中发挥特异性受体作用,而唾液酸在IBV感染宿主细胞中发挥辅助受体作用,硫酸乙酰肝素不是IBV在自然感染中的必需因素,同时提示,可能存在其他未知受体因子参与IBV感染宿主细胞的过程.
본연구지재천명계안태매N(chAPN)、타액산이급류산을선간소재전염성지기관염병독(IBV)M41주감염숙주세포중적작용이급3충수체특이억제제대IBV M41주재자연숙주CEK세포내증식능력적영향.작자선택분정억제소(Bestatin)、신경안산매(NA)화간소매Ⅲ분별작위APN、타액산이급류산을선간소적억제제,재불동조건하,단독혹공동예처리CEK세포,이후접입IBV M41주병독감염세포,응용형광정량PCR방법정량검측IBVM41주재CEK세포중적증식변화,응용계배반수감염제량법(EID50)측정병독감염계배능력적변화.결과표명,경Bestatin화NA처리적CEK세포획득료저항IBV M41주감염적능력,여미경처리적(대조조)세포상비,Bestatin화NA능현저강저IBV M41주재CEK세포내적증식급대계배적감염능력(P＜0.01),차Bestatin처리후CEK세포내적병독증식량현저저우NA처리후CEK세포내적병독증식량,량자병독액적EID50적정치차이현저(P＜0.01);간소매Ⅲ적처리칙대병독증식무현저영향;3충수체억제제공동처리CEK세포후,병독증식량현저하강(P＜0.01),단잉유병독증식,병독액적EID50적정치위102.12±0.05·0.1 mL-1.결과제시,chAPN재IBV감염숙주세포적과정중발휘특이성수체작용,이타액산재IBV감염숙주세포중발휘보조수체작용,류산을선간소불시IBV재자연감염중적필수인소,동시제시,가능존재기타미지수체인자삼여IBV감염숙주세포적과정.