生物技术进展
生物技術進展
생물기술진전
2012年
4期
282-287,封3
,共7页
王树坤%郎洪武%李轶女%陈晓春%张志芳
王樹坤%郎洪武%李軼女%陳曉春%張誌芳
왕수곤%랑홍무%리질녀%진효춘%장지방
猪流行性腹泻病毒%S基因%原核表达%质谱%抗原性
豬流行性腹瀉病毒%S基因%原覈錶達%質譜%抗原性
저류행성복사병독%S기인%원핵표체%질보%항원성
为研究猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus PEDV)S基因片段的原核表达产物是否具有抗原性,分析S基因抗原位点后,用PCR技术扩增S蛋白主要抗原区的核酸序列,经克隆后将目的片段连接到原核表达载体pET-28a(+)中,成功构建了重组质粒pET-28a-PEDV-Sp,其重组菌于37℃、0.5 mmol/L IPTG诱导表达4h后进行SDSPAGE分析,在分子质量约为29 kDa处出现一新蛋白带,与预期相符.质谱鉴定表明,已成功表达了目的蛋白.纯化后的重组蛋白免疫兔制备多克隆抗体,抗体效价检测结果显示该蛋白具有良好的抗原性.该研究为猪流行性腹泻基因工程疫苗的研制奠定基础.
為研究豬流行性腹瀉病毒(porcine epidemic diarrhea virus PEDV)S基因片段的原覈錶達產物是否具有抗原性,分析S基因抗原位點後,用PCR技術擴增S蛋白主要抗原區的覈痠序列,經剋隆後將目的片段連接到原覈錶達載體pET-28a(+)中,成功構建瞭重組質粒pET-28a-PEDV-Sp,其重組菌于37℃、0.5 mmol/L IPTG誘導錶達4h後進行SDSPAGE分析,在分子質量約為29 kDa處齣現一新蛋白帶,與預期相符.質譜鑒定錶明,已成功錶達瞭目的蛋白.純化後的重組蛋白免疫兔製備多剋隆抗體,抗體效價檢測結果顯示該蛋白具有良好的抗原性.該研究為豬流行性腹瀉基因工程疫苗的研製奠定基礎.
위연구저류행성복사병독(porcine epidemic diarrhea virus PEDV)S기인편단적원핵표체산물시부구유항원성,분석S기인항원위점후,용PCR기술확증S단백주요항원구적핵산서렬,경극륭후장목적편단련접도원핵표체재체pET-28a(+)중,성공구건료중조질립pET-28a-PEDV-Sp,기중조균우37℃、0.5 mmol/L IPTG유도표체4h후진행SDSPAGE분석,재분자질량약위29 kDa처출현일신단백대,여예기상부.질보감정표명,이성공표체료목적단백.순화후적중조단백면역토제비다극륭항체,항체효개검측결과현시해단백구유량호적항원성.해연구위저류행성복사기인공정역묘적연제전정기출.
