CAJ | 학술논문

为构建表达H5亚型禽流感病毒(AIV)A/Duck/Anhui/1/06(H5N1)(简称AH/06)HA蛋白的重组禽痘病毒,本研究利用感染-转染的方法通过转移载体pSY681-gfp-gpt将AIV株AH/06的HA基因同源重组到禽痘病毒(FPV)中,并利用gfp和gpt双重筛选标记在鸡胚成纤维细胞中经过多轮筛选,得到纯化的重组禽痘病毒(rFPV-gfp-gpt-AHHA).通过PCR、序列测定和western blot的方法对rFPV-gfp-gpt-AHHA进行鉴定和抗原活性分析.结果表明AH/06的HA基因稳定的重组到rFPV-gfp-gpt-AHHA中,其表达的HA蛋白能够与AH/06的阳性血清反应,显示出了良好的抗原性.同时病毒的生长曲线也显示外源HA基因的插入并没有影响亲本病毒的复制.这些结果为进一步的免疫效力研究奠定了基础.
위구건표체H5아형금류감병독(AIV)A/Duck/Anhui/1/06(H5N1)(간칭AH/06)HA단백적중조금두병독,본연구이용감염-전염적방법통과전이재체pSY681-gfp-gpt장AIV주AH/06적HA기인동원중조도금두병독(FPV)중,병이용gfp화gpt쌍중사선표기재계배성섬유세포중경과다륜사선,득도순화적중조금두병독(rFPV-gfp-gpt-AHHA).통과PCR、서렬측정화western blot적방법대rFPV-gfp-gpt-AHHA진행감정화항원활성분석.결과표명AH/06적HA기인은정적중조도rFPV-gfp-gpt-AHHA중,기표체적HA단백능구여AH/06적양성혈청반응,현시출료량호적항원성.동시병독적생장곡선야현시외원HA기인적삽입병몰유영향친본병독적복제.저사결과위진일보적면역효력연구전정료기출.