中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2012年
10期
37-41
,共5页
赵胤泽%汪琳%邢佑尚%张灿
趙胤澤%汪琳%邢祐尚%張燦
조윤택%왕림%형우상%장찬
非洲马瘟病毒%西尼罗热病毒%马冠状病毒%基因芯片%检测
非洲馬瘟病毒%西尼囉熱病毒%馬冠狀病毒%基因芯片%檢測
비주마온병독%서니라열병독%마관상병독%기인심편%검측
为探索建立马病病毒基因芯片检测方法,采用人工拼接的方式拼接了非洲马瘟病毒(ASHV)核酸序列,通过分子克隆技术获得西尼罗病毒(WNV)和马冠状病毒(ECV)的特异基因片段.用芯片点样仪逐点分配到处理过的玻片上,制备成检测芯片.以拼接、克隆的核酸序列为模板通过多重不对称RT-PCR进行特异性扩增和荧光标记后滴加到芯片上进行杂交,对杂交结果进行扫描检测和计算机软件分析.结果显示,制备的基因芯片可同时检测和鉴别上述3种病毒,ECV质粒样品、WNV质粒样品检测灵敏度为102拷贝；AHSV质粒样品检测灵敏度为104拷贝.其他病毒材料未出现荧光信号,验证了本方法的特异性.证明基因芯片技术可快速、准确和灵敏地同时进行多种病毒的检测.
為探索建立馬病病毒基因芯片檢測方法,採用人工拼接的方式拼接瞭非洲馬瘟病毒(ASHV)覈痠序列,通過分子剋隆技術穫得西尼囉病毒(WNV)和馬冠狀病毒(ECV)的特異基因片段.用芯片點樣儀逐點分配到處理過的玻片上,製備成檢測芯片.以拼接、剋隆的覈痠序列為模闆通過多重不對稱RT-PCR進行特異性擴增和熒光標記後滴加到芯片上進行雜交,對雜交結果進行掃描檢測和計算機軟件分析.結果顯示,製備的基因芯片可同時檢測和鑒彆上述3種病毒,ECV質粒樣品、WNV質粒樣品檢測靈敏度為102拷貝；AHSV質粒樣品檢測靈敏度為104拷貝.其他病毒材料未齣現熒光信號,驗證瞭本方法的特異性.證明基因芯片技術可快速、準確和靈敏地同時進行多種病毒的檢測.
위탐색건립마병병독기인심편검측방법,채용인공병접적방식병접료비주마온병독(ASHV)핵산서렬,통과분자극륭기술획득서니라병독(WNV)화마관상병독(ECV)적특이기인편단.용심편점양의축점분배도처리과적파편상,제비성검측심편.이병접、극륭적핵산서렬위모판통과다중불대칭RT-PCR진행특이성확증화형광표기후적가도심편상진행잡교,대잡교결과진행소묘검측화계산궤연건분석.결과현시,제비적기인심편가동시검측화감별상술3충병독,ECV질립양품、WNV질립양품검측령민도위102고패；AHSV질립양품검측령민도위104고패.기타병독재료미출현형광신호,험증료본방법적특이성.증명기인심편기술가쾌속、준학화령민지동시진행다충병독적검측.
