成都大学学报（自然科学版）
成都大學學報（自然科學版）
성도대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF CHENGDU UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2001年
4期
21-25
,共5页
虫草%菌种分离%菌种纯化%发酵虫草菌丝体
蟲草%菌種分離%菌種純化%髮酵蟲草菌絲體
충초%균충분리%균충순화%발효충초균사체
本试验系用生物工程技术分离纯化虫草菌种的研究.先用组织分离法从野生虫草整体组织上分离出虫草菌种,再用平板稀释法将菌种纯化,获得一株高产D-甘露醇(虫草酸)的优良菌种.该菌种被鉴定为蝙蝠蛾拟青霉.使用该菌种经一级种子培养和发酵培养,获得含D-甘露醇9.9%(野生虫草约7%)、总氮5.1%(野生虫草约4%)的虫草菌丝体.原种斜面培养基组成(%):琼脂2、葡萄糖2、蛋白胨0.2、磷酸二氢钾0.1、硫酸镁0.03、麦麸5.种子培养基组成(%);葡萄糖2、蛋白胨0.5、磷酸二氢钾0.1、硫酸镁0.03、麦麸5.原种培养温度23-24℃、培养时间4-5天;平均稀释纯化所用稀释菌液为10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6,挑菌培养温度分别为23-24℃、28℃、37℃.种子培养条件:一级种子培养:摇床转速180r/min,培养温度24-25℃,时间2-3天;二级种子培养;摇床转速90r/min,培养温度24-25℃,时间2天.发酵培养条件;接种量5-10%,温度24-26℃,搅拌速度150-180r/min,通气培养,时间5-6天,PH4.5,残糖量降至0.3%.
本試驗繫用生物工程技術分離純化蟲草菌種的研究.先用組織分離法從野生蟲草整體組織上分離齣蟲草菌種,再用平闆稀釋法將菌種純化,穫得一株高產D-甘露醇(蟲草痠)的優良菌種.該菌種被鑒定為蝙蝠蛾擬青黴.使用該菌種經一級種子培養和髮酵培養,穫得含D-甘露醇9.9%(野生蟲草約7%)、總氮5.1%(野生蟲草約4%)的蟲草菌絲體.原種斜麵培養基組成(%):瓊脂2、葡萄糖2、蛋白胨0.2、燐痠二氫鉀0.1、硫痠鎂0.03、麥麩5.種子培養基組成(%);葡萄糖2、蛋白胨0.5、燐痠二氫鉀0.1、硫痠鎂0.03、麥麩5.原種培養溫度23-24℃、培養時間4-5天;平均稀釋純化所用稀釋菌液為10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6,挑菌培養溫度分彆為23-24℃、28℃、37℃.種子培養條件:一級種子培養:搖床轉速180r/min,培養溫度24-25℃,時間2-3天;二級種子培養;搖床轉速90r/min,培養溫度24-25℃,時間2天.髮酵培養條件;接種量5-10%,溫度24-26℃,攪拌速度150-180r/min,通氣培養,時間5-6天,PH4.5,殘糖量降至0.3%.
본시험계용생물공정기술분리순화충초균충적연구.선용조직분리법종야생충초정체조직상분리출충초균충,재용평판희석법장균충순화,획득일주고산D-감로순(충초산)적우량균충.해균충피감정위편복아의청매.사용해균충경일급충자배양화발효배양,획득함D-감로순9.9%(야생충초약7%)、총담5.1%(야생충초약4%)적충초균사체.원충사면배양기조성(%):경지2、포도당2、단백동0.2、린산이경갑0.1、류산미0.03、맥부5.충자배양기조성(%);포도당2、단백동0.5、린산이경갑0.1、류산미0.03、맥부5.원충배양온도23-24℃、배양시간4-5천;평균희석순화소용희석균액위10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6,도균배양온도분별위23-24℃、28℃、37℃.충자배양조건:일급충자배양:요상전속180r/min,배양온도24-25℃,시간2-3천;이급충자배양;요상전속90r/min,배양온도24-25℃,시간2천.발효배양조건;접충량5-10%,온도24-26℃,교반속도150-180r/min,통기배양,시간5-6천,PH4.5,잔당량강지0.3%.
