复旦学报(医学版)
複旦學報(醫學版)
복단학보(의학판)
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2007年
2期
223-227
,共5页
徐国萍%徐璟达%李海霞%陈琦%赵仲华%刁自强%许祖德
徐國萍%徐璟達%李海霞%陳琦%趙仲華%刁自彊%許祖德
서국평%서경체%리해하%진기%조중화%조자강%허조덕
转化生长因子β1%肺泡Ⅱ型上皮细胞%上皮细胞-间质细胞转变
轉化生長因子β1%肺泡Ⅱ型上皮細胞%上皮細胞-間質細胞轉變
전화생장인자β1%폐포Ⅱ형상피세포%상피세포-간질세포전변
目的 检测转化生长因子(TGF-β1)能否在体外诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞-间质细胞转变(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及其相应的信号转导机制.方法 在体外培养的大鼠肺泡Ⅱ型细胞(RLE-6TN)中加入TGF-β1后,于不同时间段收取细胞,分别采用Real-time PCR及Western blot检测上皮及间质细胞标志物表达的改变;Western blot检测TGF-β1对RLE-6TN细胞p-Smad 2/3表达的影响;TGF-β1诱导的RLE-6TN细胞形态学的改变采用倒置相差显微镜观察,超微结构的改变采用透射电子显微镜观察.结果 加入TGF-β1到RLE-6TN细胞后,其间质细胞标志物表达上调,上皮细胞标志物的表达下调;加入TGF-β1到RLE-6TN细胞后,其p-Smad 2/3的表达明显上调;形态学上,TGF-β1诱导RLE-6TN细胞向成肌纤维细胞样细胞转变;超微结构上,TGF-β1诱导RLE-6TN细胞特有的嗜锇性板层小体发生变性、肿胀并随TGF-β1作用时间延长最终完全消失.结论 TGF-β1能在体外诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞向间质细胞转变,其机制部分与Smad信号转导途径相关.
目的 檢測轉化生長因子(TGF-β1)能否在體外誘導肺泡Ⅱ型上皮細胞-間質細胞轉變(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及其相應的信號轉導機製.方法 在體外培養的大鼠肺泡Ⅱ型細胞(RLE-6TN)中加入TGF-β1後,于不同時間段收取細胞,分彆採用Real-time PCR及Western blot檢測上皮及間質細胞標誌物錶達的改變;Western blot檢測TGF-β1對RLE-6TN細胞p-Smad 2/3錶達的影響;TGF-β1誘導的RLE-6TN細胞形態學的改變採用倒置相差顯微鏡觀察,超微結構的改變採用透射電子顯微鏡觀察.結果 加入TGF-β1到RLE-6TN細胞後,其間質細胞標誌物錶達上調,上皮細胞標誌物的錶達下調;加入TGF-β1到RLE-6TN細胞後,其p-Smad 2/3的錶達明顯上調;形態學上,TGF-β1誘導RLE-6TN細胞嚮成肌纖維細胞樣細胞轉變;超微結構上,TGF-β1誘導RLE-6TN細胞特有的嗜鋨性闆層小體髮生變性、腫脹併隨TGF-β1作用時間延長最終完全消失.結論 TGF-β1能在體外誘導肺泡Ⅱ型上皮細胞嚮間質細胞轉變,其機製部分與Smad信號轉導途徑相關.
목적 검측전화생장인자(TGF-β1)능부재체외유도폐포Ⅱ형상피세포-간질세포전변(epithelial-mesenchymal transition,EMT)급기상응적신호전도궤제.방법 재체외배양적대서폐포Ⅱ형세포(RLE-6TN)중가입TGF-β1후,우불동시간단수취세포,분별채용Real-time PCR급Western blot검측상피급간질세포표지물표체적개변;Western blot검측TGF-β1대RLE-6TN세포p-Smad 2/3표체적영향;TGF-β1유도적RLE-6TN세포형태학적개변채용도치상차현미경관찰,초미결구적개변채용투사전자현미경관찰.결과 가입TGF-β1도RLE-6TN세포후,기간질세포표지물표체상조,상피세포표지물적표체하조;가입TGF-β1도RLE-6TN세포후,기p-Smad 2/3적표체명현상조;형태학상,TGF-β1유도RLE-6TN세포향성기섬유세포양세포전변;초미결구상,TGF-β1유도RLE-6TN세포특유적기철성판층소체발생변성、종창병수TGF-β1작용시간연장최종완전소실.결론 TGF-β1능재체외유도폐포Ⅱ형상피세포향간질세포전변,기궤제부분여Smad신호전도도경상관.