世界华人消化杂志
世界華人消化雜誌
세계화인소화잡지
WORLD CHINESE JOURNAL OF DIGESTOLOGY
2007年
28期
2990-2994
,共5页
毛涛%殷凡%田字彬%厉海妮%孔心涓%刘希双%张海燕
毛濤%慇凡%田字彬%厲海妮%孔心涓%劉希雙%張海燕
모도%은범%전자빈%려해니%공심연%류희쌍%장해연
乙型肝炎病毒%核酶%核糖核酸酶P%基因治疗%逆转录聚合酶链式反应%酶联免疫吸附试验
乙型肝炎病毒%覈酶%覈糖覈痠酶P%基因治療%逆轉錄聚閤酶鏈式反應%酶聯免疫吸附試驗
을형간염병독%핵매%핵당핵산매P%기인치료%역전록취합매련식반응%매련면역흡부시험
目的:研究靶向HBV S区和C区基因的M1GSRNA核酶共同作用对HBV基因表达的影响.方法:选择HBV ayw亚型S区基因294 nt和C区基因2333 nt为切割位点,以含有编码M1 RNA的DNA序列的质粒pTK117为模板.通过PCR扩增得到M1GS RNA核酶的DNA模板,并将其克隆至真核表达载体pEGFP-C1得到重组质粒pEGFP-GSS和pEGFP-GSC.将2个重组质粒共转染HepG2.2.15细胞,转染后ELISA法测细胞培养液中的HBsAg和HBeAg,RT-PCR检测HBV mRNA.结果:成功构建了分别靶向HBV S区基因和C区基因的真核表达载体.共转染HepG2.2.15细胞后,HBsAg和HBeAg的表达分别被抑制了33.2%和39.1%.HBV C mRNA和S mRNA分别被抑制了32.5%和29.7%,而HepG2.2.15细胞的增殖无明显变化.结论:靶向HBV S区和C区基因的M1GS RNA核酶共同作用可特异性抑制HBV S区和C区基因的表达.
目的:研究靶嚮HBV S區和C區基因的M1GSRNA覈酶共同作用對HBV基因錶達的影響.方法:選擇HBV ayw亞型S區基因294 nt和C區基因2333 nt為切割位點,以含有編碼M1 RNA的DNA序列的質粒pTK117為模闆.通過PCR擴增得到M1GS RNA覈酶的DNA模闆,併將其剋隆至真覈錶達載體pEGFP-C1得到重組質粒pEGFP-GSS和pEGFP-GSC.將2箇重組質粒共轉染HepG2.2.15細胞,轉染後ELISA法測細胞培養液中的HBsAg和HBeAg,RT-PCR檢測HBV mRNA.結果:成功構建瞭分彆靶嚮HBV S區基因和C區基因的真覈錶達載體.共轉染HepG2.2.15細胞後,HBsAg和HBeAg的錶達分彆被抑製瞭33.2%和39.1%.HBV C mRNA和S mRNA分彆被抑製瞭32.5%和29.7%,而HepG2.2.15細胞的增殖無明顯變化.結論:靶嚮HBV S區和C區基因的M1GS RNA覈酶共同作用可特異性抑製HBV S區和C區基因的錶達.
목적:연구파향HBV S구화C구기인적M1GSRNA핵매공동작용대HBV기인표체적영향.방법:선택HBV ayw아형S구기인294 nt화C구기인2333 nt위절할위점,이함유편마M1 RNA적DNA서렬적질립pTK117위모판.통과PCR확증득도M1GS RNA핵매적DNA모판,병장기극륭지진핵표체재체pEGFP-C1득도중조질립pEGFP-GSS화pEGFP-GSC.장2개중조질립공전염HepG2.2.15세포,전염후ELISA법측세포배양액중적HBsAg화HBeAg,RT-PCR검측HBV mRNA.결과:성공구건료분별파향HBV S구기인화C구기인적진핵표체재체.공전염HepG2.2.15세포후,HBsAg화HBeAg적표체분별피억제료33.2%화39.1%.HBV C mRNA화S mRNA분별피억제료32.5%화29.7%,이HepG2.2.15세포적증식무명현변화.결론:파향HBV S구화C구기인적M1GS RNA핵매공동작용가특이성억제HBV S구화C구기인적표체.
