生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2008年
1期
153-158
,共6页
周铭%蔡春尔%柳俊秀%吴维宁%何培民
週銘%蔡春爾%柳俊秀%吳維寧%何培民
주명%채춘이%류준수%오유저%하배민
R-藻红蛋白%单克隆抗体%交联%荧光探针%制备%条件优化
R-藻紅蛋白%單剋隆抗體%交聯%熒光探針%製備%條件優化
R-조홍단백%단극륭항체%교련%형광탐침%제비%조건우화
通过化学方法使条斑紫菜R-藻红蛋白与抗体进行交联以制备荧光探针,并对制备条件进行优化.首先采用异双功能试剂SPDP(N-琥珀酰亚氨基-3-2-吡啶基二硫丙酸醇)和DTT(二硫苏糖醇)分别使R-PE(R-藻红蛋白)衍生化、IgG(单克隆抗体)巯基化,其次测定了SPDP与R-PE不同摩尔比对R-PE衍生化的影响、DTT与IgG不同摩尔比对IgG巯基化的影响,结果表明:SPDP与R-PE的最佳摩尔比为40:1,DTT与IgG的最佳摩尔比为500:1.在此基础上,建立了R-PE与IgG交联的制备技术.并应用全波长扫描吸收光谱、电泳分析和荧光显微镜观察等监测和分析技术,证实了藻红蛋白与抗体已成功交联形成了复合物.
通過化學方法使條斑紫菜R-藻紅蛋白與抗體進行交聯以製備熒光探針,併對製備條件進行優化.首先採用異雙功能試劑SPDP(N-琥珀酰亞氨基-3-2-吡啶基二硫丙痠醇)和DTT(二硫囌糖醇)分彆使R-PE(R-藻紅蛋白)衍生化、IgG(單剋隆抗體)巰基化,其次測定瞭SPDP與R-PE不同摩爾比對R-PE衍生化的影響、DTT與IgG不同摩爾比對IgG巰基化的影響,結果錶明:SPDP與R-PE的最佳摩爾比為40:1,DTT與IgG的最佳摩爾比為500:1.在此基礎上,建立瞭R-PE與IgG交聯的製備技術.併應用全波長掃描吸收光譜、電泳分析和熒光顯微鏡觀察等鑑測和分析技術,證實瞭藻紅蛋白與抗體已成功交聯形成瞭複閤物.
통과화학방법사조반자채R-조홍단백여항체진행교련이제비형광탐침,병대제비조건진행우화.수선채용이쌍공능시제SPDP(N-호박선아안기-3-2-필정기이류병산순)화DTT(이류소당순)분별사R-PE(R-조홍단백)연생화、IgG(단극륭항체)구기화,기차측정료SPDP여R-PE불동마이비대R-PE연생화적영향、DTT여IgG불동마이비대IgG구기화적영향,결과표명:SPDP여R-PE적최가마이비위40:1,DTT여IgG적최가마이비위500:1.재차기출상,건립료R-PE여IgG교련적제비기술.병응용전파장소묘흡수광보、전영분석화형광현미경관찰등감측화분석기술,증실료조홍단백여항체이성공교련형성료복합물.
