高压物理学报
高壓物理學報
고압물이학보
CHINESE JOURNAL OF HIGH PRESSURE PHYSICS
2008年
4期
370-376
,共7页
高压%抑制差减杂交%水稻
高壓%抑製差減雜交%水稻
고압%억제차감잡교%수도
为了研究高压处理对高等植物基因表达的影响,以萌发过程中经高压处理后的水稻种子的mRNA作为检测子(Tester),以对照样品的mRNA作为驱动子(Driver),采用抑制差减杂交(SSH)结合镜像选择技术(MOS)构建了高压处理后水稻种子萌发过程中诱导表达的差减cDNA文库,并通过蓝白斑筛选获得了580个重组克隆.菌液PCR检测结果表明,这些克隆中的插入片段的大小主要分布在200~1000 bp之间,平均大小约为575 bp,其中单一扩增条带的有效重组克隆数为542个,有效的重组克隆率为93.3%.对部分重组克隆进行测序发现,受高压诱导表达的基因主要涉及到代谢、胁迫响应、转录调控等方面.为高压处理后水稻种子基因表达模式变化的研究打下了基础.
為瞭研究高壓處理對高等植物基因錶達的影響,以萌髮過程中經高壓處理後的水稻種子的mRNA作為檢測子(Tester),以對照樣品的mRNA作為驅動子(Driver),採用抑製差減雜交(SSH)結閤鏡像選擇技術(MOS)構建瞭高壓處理後水稻種子萌髮過程中誘導錶達的差減cDNA文庫,併通過藍白斑篩選穫得瞭580箇重組剋隆.菌液PCR檢測結果錶明,這些剋隆中的插入片段的大小主要分佈在200~1000 bp之間,平均大小約為575 bp,其中單一擴增條帶的有效重組剋隆數為542箇,有效的重組剋隆率為93.3%.對部分重組剋隆進行測序髮現,受高壓誘導錶達的基因主要涉及到代謝、脅迫響應、轉錄調控等方麵.為高壓處理後水稻種子基因錶達模式變化的研究打下瞭基礎.
위료연구고압처리대고등식물기인표체적영향,이맹발과정중경고압처리후적수도충자적mRNA작위검측자(Tester),이대조양품적mRNA작위구동자(Driver),채용억제차감잡교(SSH)결합경상선택기술(MOS)구건료고압처리후수도충자맹발과정중유도표체적차감cDNA문고,병통과람백반사선획득료580개중조극륭.균액PCR검측결과표명,저사극륭중적삽입편단적대소주요분포재200~1000 bp지간,평균대소약위575 bp,기중단일확증조대적유효중조극륭수위542개,유효적중조극륭솔위93.3%.대부분중조극륭진행측서발현,수고압유도표체적기인주요섭급도대사、협박향응、전록조공등방면.위고압처리후수도충자기인표체모식변화적연구타하료기출.