生物化学与生物物理进展
生物化學與生物物理進展
생물화학여생물물리진전
PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
2009年
10期
1327-1333
,共7页
刘铭瑶%王文飞%于艺雪%侯玉婷%任桂萍%李德山
劉銘瑤%王文飛%于藝雪%侯玉婷%任桂萍%李德山
류명요%왕문비%우예설%후옥정%임계평%리덕산
胰岛素抵抗%细胞模型%HepG2%FGF-21
胰島素牴抗%細胞模型%HepG2%FGF-21
이도소저항%세포모형%HepG2%FGF-21
在体外建立胰岛素抵抗肝细胞模型,探讨在胰岛素抵抗状态下成纤维细胞生长因子(FGF)-21对模型细胞糖代谢的影响及机制.将HepG2细胞置于10-7mol/L的胰岛素培养基中培养24 h,建立胰岛素抵抗细胞模型.分别用不同浓度的胰岛素和FGF-21处理模型细胞,采用葡萄糖氧化酶-氧化物酶(GOD-POD)法检测细胞对葡萄糖的摄取情况,并检查胰岛素与FGF-21的协同作用.利用实时荧光定量PCR检测FGF-21对模型细胞葡萄精转运蛋白1(GLUT1)mRNA表达的影响,蒽酮法检测模型细胞精原合成量,探讨FGF-21对胰岛素抵抗细胞模型葡萄糖摄取的影响及机制.结果发现,用高浓度胰岛素处理HepG2细胞24 h后,细胞对胰岛素的敏感性显著降低,说明成功建立了胰岛素抵抗细胞模型,抵抗状态可维持48 h,未发现细胞形态学变化.FGF-21能改善胰岛素抵抗模型细胞的葡萄糖摄取,参与肝糖原的合成,并与胰岛素产生协同作用.实时荧光定量PCR结果发现,FGF-21作用模犁细胞后,细胞的GLUT1 mRNA表达量显著增加,说明FGF-21促进模型细胞摄取葡萄糖的作用机制与其增加GLUT1的表达有关.
在體外建立胰島素牴抗肝細胞模型,探討在胰島素牴抗狀態下成纖維細胞生長因子(FGF)-21對模型細胞糖代謝的影響及機製.將HepG2細胞置于10-7mol/L的胰島素培養基中培養24 h,建立胰島素牴抗細胞模型.分彆用不同濃度的胰島素和FGF-21處理模型細胞,採用葡萄糖氧化酶-氧化物酶(GOD-POD)法檢測細胞對葡萄糖的攝取情況,併檢查胰島素與FGF-21的協同作用.利用實時熒光定量PCR檢測FGF-21對模型細胞葡萄精轉運蛋白1(GLUT1)mRNA錶達的影響,蒽酮法檢測模型細胞精原閤成量,探討FGF-21對胰島素牴抗細胞模型葡萄糖攝取的影響及機製.結果髮現,用高濃度胰島素處理HepG2細胞24 h後,細胞對胰島素的敏感性顯著降低,說明成功建立瞭胰島素牴抗細胞模型,牴抗狀態可維持48 h,未髮現細胞形態學變化.FGF-21能改善胰島素牴抗模型細胞的葡萄糖攝取,參與肝糖原的閤成,併與胰島素產生協同作用.實時熒光定量PCR結果髮現,FGF-21作用模犛細胞後,細胞的GLUT1 mRNA錶達量顯著增加,說明FGF-21促進模型細胞攝取葡萄糖的作用機製與其增加GLUT1的錶達有關.
재체외건립이도소저항간세포모형,탐토재이도소저항상태하성섬유세포생장인자(FGF)-21대모형세포당대사적영향급궤제.장HepG2세포치우10-7mol/L적이도소배양기중배양24 h,건립이도소저항세포모형.분별용불동농도적이도소화FGF-21처리모형세포,채용포도당양화매-양화물매(GOD-POD)법검측세포대포도당적섭취정황,병검사이도소여FGF-21적협동작용.이용실시형광정량PCR검측FGF-21대모형세포포도정전운단백1(GLUT1)mRNA표체적영향,은동법검측모형세포정원합성량,탐토FGF-21대이도소저항세포모형포도당섭취적영향급궤제.결과발현,용고농도이도소처리HepG2세포24 h후,세포대이도소적민감성현저강저,설명성공건립료이도소저항세포모형,저항상태가유지48 h,미발현세포형태학변화.FGF-21능개선이도소저항모형세포적포도당섭취,삼여간당원적합성,병여이도소산생협동작용.실시형광정량PCR결과발현,FGF-21작용모리세포후,세포적GLUT1 mRNA표체량현저증가,설명FGF-21촉진모형세포섭취포도당적작용궤제여기증가GLUT1적표체유관.
