广西医科大学学报
廣西醫科大學學報
엄서의과대학학보
JOURNAL OF GUANGXI MEDICAL UNIVERSITY
2010年
3期
357-360
,共4页
HBx基因%质粒%绿荧光蛋白%肝癌细胞
HBx基因%質粒%綠熒光蛋白%肝癌細胞
HBx기인%질립%록형광단백%간암세포
目的:克隆乙肝病毒HBx基因及构建增强型绿色荧光蛋白-HBx基因(pEGFP-N1-HBx)荧光真核表达质粒并进行表达鉴定.方法:以CH-HEP-1肝癌细胞株基因组DNA为模板PCR法扩增HBx基因,PCR产物测序分析正确后克隆至真核表达载体pEGFP-N1,命名为pEGFP-N1-HBx.将该质粒转染肝细胞株HepG2以RT-PCR及荧光显微镜检测其表达情况.结果:酶切鉴定和序列分析证实构建质粒含HBx基因,RT-PCR检测和荧光显微镜观察表明构建的pEGFP-N1-HBx在肝癌细胞株HepG2真核细胞中表达,且其绿色荧光蛋白瞬时表达率为20%～30%.结论:HBx基因克隆及其真核表达载体pEGFP-N1-HBx构建成功,可用于肝癌发生发展的生物学研究.
目的:剋隆乙肝病毒HBx基因及構建增彊型綠色熒光蛋白-HBx基因(pEGFP-N1-HBx)熒光真覈錶達質粒併進行錶達鑒定.方法:以CH-HEP-1肝癌細胞株基因組DNA為模闆PCR法擴增HBx基因,PCR產物測序分析正確後剋隆至真覈錶達載體pEGFP-N1,命名為pEGFP-N1-HBx.將該質粒轉染肝細胞株HepG2以RT-PCR及熒光顯微鏡檢測其錶達情況.結果:酶切鑒定和序列分析證實構建質粒含HBx基因,RT-PCR檢測和熒光顯微鏡觀察錶明構建的pEGFP-N1-HBx在肝癌細胞株HepG2真覈細胞中錶達,且其綠色熒光蛋白瞬時錶達率為20%～30%.結論:HBx基因剋隆及其真覈錶達載體pEGFP-N1-HBx構建成功,可用于肝癌髮生髮展的生物學研究.
목적:극륭을간병독HBx기인급구건증강형록색형광단백-HBx기인(pEGFP-N1-HBx)형광진핵표체질립병진행표체감정.방법:이CH-HEP-1간암세포주기인조DNA위모판PCR법확증HBx기인,PCR산물측서분석정학후극륭지진핵표체재체pEGFP-N1,명명위pEGFP-N1-HBx.장해질립전염간세포주HepG2이RT-PCR급형광현미경검측기표체정황.결과:매절감정화서렬분석증실구건질립함HBx기인,RT-PCR검측화형광현미경관찰표명구건적pEGFP-N1-HBx재간암세포주HepG2진핵세포중표체,차기록색형광단백순시표체솔위20%～30%.결론:HBx기인극륭급기진핵표체재체pEGFP-N1-HBx구건성공,가용우간암발생발전적생물학연구.
