安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
20期
12221-12222
,共2页
鸡%CD8α%原核表达%单克隆抗体
鷄%CD8α%原覈錶達%單剋隆抗體
계%CD8α%원핵표체%단극륭항체
[目的]获得研究鸡CD8分子的单克隆抗体.[方法]用自行设计的引物PCR扩增鸡CD8分子α链部分基因片段,构建2个原核重组质柱,该片段经原核表达和纯化后免疫BALb/c小鼠,最后将免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,细胞上清液用ELISA检测.[结果]PCR扩增获得大小约为510bp的基因片段.构建的pET-32a-CD8α导入大肠杆菌,诱导表达获得了大小为39 kD的融合蛋白His-CD8α.融合细胞经亚克隆,其上清液用ELISA检测和筛选,获得1株稳定传代和分泌抗CD8α的抗体的杂交瘤细胞株.该株细胞被命名为C11.上清液的ELISA抗体效价达1:600.[结论]该研究以原核表达的CD8α为抗原制备了1株单克隆抗体.
[目的]穫得研究鷄CD8分子的單剋隆抗體.[方法]用自行設計的引物PCR擴增鷄CD8分子α鏈部分基因片段,構建2箇原覈重組質柱,該片段經原覈錶達和純化後免疫BALb/c小鼠,最後將免疫小鼠脾細胞與骨髓瘤細胞融閤,細胞上清液用ELISA檢測.[結果]PCR擴增穫得大小約為510bp的基因片段.構建的pET-32a-CD8α導入大腸桿菌,誘導錶達穫得瞭大小為39 kD的融閤蛋白His-CD8α.融閤細胞經亞剋隆,其上清液用ELISA檢測和篩選,穫得1株穩定傳代和分泌抗CD8α的抗體的雜交瘤細胞株.該株細胞被命名為C11.上清液的ELISA抗體效價達1:600.[結論]該研究以原覈錶達的CD8α為抗原製備瞭1株單剋隆抗體.
[목적]획득연구계CD8분자적단극륭항체.[방법]용자행설계적인물PCR확증계CD8분자α련부분기인편단,구건2개원핵중조질주,해편단경원핵표체화순화후면역BALb/c소서,최후장면역소서비세포여골수류세포융합,세포상청액용ELISA검측.[결과]PCR확증획득대소약위510bp적기인편단.구건적pET-32a-CD8α도입대장간균,유도표체획득료대소위39 kD적융합단백His-CD8α.융합세포경아극륭,기상청액용ELISA검측화사선,획득1주은정전대화분비항CD8α적항체적잡교류세포주.해주세포피명명위C11.상청액적ELISA항체효개체1:600.[결론]해연구이원핵표체적CD8α위항원제비료1주단극륭항체.
