鸭乙型肝炎病毒cccDNA Taq Man荧光定量PCR的建立
압을형간염병독cccDNA Taq Man형광정량PCR적건립
Establishment of the method for detecting DHBV cccDNA by the TaqMan fluorescence quantitative PCR
  • 万方数据
    中华微生物学和免疫学杂志 중화미생물학화면역학잡지
    CHINESE JOURNAL OF MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
    2007年 7期 656-659 ,共4页

    付美丽%林青%刘小朋%施水兰%陈少华%郑丽雅%林福海%李东良%陈紫榕

    부미려%림청%류소붕%시수란%진소화%정려아%림복해%리동량%진자용

    鸭%乙型肝炎病毒%脱氧核糖核酸%共价闭合环状%聚合酶链反应 鴨%乙型肝炎病毒%脫氧覈糖覈痠%共價閉閤環狀%聚閤酶鏈反應
    압%을형간염병독%탈양핵당핵산%공개폐합배상%취합매련반응
    目的 建立鸭乙型肝炎病毒(DHBV)cccDNA TaqMan荧光定量PCR方法.方法 用pUCm-T载体和PCR纯化产物连接,转染TOP10菌,筛选阳性菌落,提取质粒,制作外标准品;在DHBV基因组负链两侧设计一对引物,并在引物问设计和荧光标记一段TaqMan探针,严格优化反应物的组成和扩增条件,建立了DHBV cccDNA TaqMan荧光定量PCR方法.结果 最低可检出104拷贝/ml;批内误差为0.2%～3.14%,批问误差为2.22%～4.43%;在105～102拷贝/ml之间与Ct值具有很好的线性[Ct=-2.8361ln(χ)+41.45,r=-0.9985].结论 该法是一种灵敏度高、特异性强、较为简便的DHBV cccDNA定量检测技术.
    목적 건립압을형간염병독(DHBV)cccDNA TaqMan형광정량PCR방법.방법 용pUCm-T재체화PCR순화산물련접,전염TOP10균,사선양성균락,제취질립,제작외표준품;재DHBV기인조부련량측설계일대인물,병재인물문설계화형광표기일단TaqMan탐침,엄격우화반응물적조성화확증조건,건립료DHBV cccDNA TaqMan형광정량PCR방법.결과 최저가검출104고패/ml;비내오차위0.2%～3.14%,비문오차위2.22%～4.43%;재105～102고패/ml지간여Ct치구유흔호적선성[Ct=-2.8361ln(χ)+41.45,r=-0.9985].결론 해법시일충령민도고、특이성강、교위간편적DHBV cccDNA정량검측기술.
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