生物化学与生物物理进展
生物化學與生物物理進展
생물화학여생물물리진전
PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
2008年
9期
1077-1083
,共7页
程彦伟%李亮%沈嵘%齐耀程%刘晓宇%王宁%张炜
程彥偉%李亮%瀋嶸%齊耀程%劉曉宇%王寧%張煒
정언위%리량%침영%제요정%류효우%왕저%장위
LRR型类受体蛋白激酶%水稻%原核表达%多克隆抗体
LRR型類受體蛋白激酶%水稻%原覈錶達%多剋隆抗體
LRR형류수체단백격매%수도%원핵표체%다극륭항체
前期研究表明,水稻根尖细胞质膜类受体蛋白激酶OsRLK的表达受盐胁迫诱导.为了进一步研究该激酶的生理功能,通过反转录PCR得到OsRLK胞外区cDNA片段,将其亚克隆至pET29a原核表达载体并在大肠杆菌中实现了高表达,表达量约为细胞总蛋白的30%.重组蛋白经SDS-PAGE分离,染色切胶收集后,作为抗原免疫新西兰家兔,分离抗血清,经纯化得到1:20 000效价的多克隆抗体.Wescem blot结果显示,该抗体能特异识别在原核表达系统内表达的抗原,以及水稻根尖细胞质膜组分中的LRR型类受体蛋白激酶,并且在蛋白质水平证实该激酶为盐胁迫响应蛋白.
前期研究錶明,水稻根尖細胞質膜類受體蛋白激酶OsRLK的錶達受鹽脅迫誘導.為瞭進一步研究該激酶的生理功能,通過反轉錄PCR得到OsRLK胞外區cDNA片段,將其亞剋隆至pET29a原覈錶達載體併在大腸桿菌中實現瞭高錶達,錶達量約為細胞總蛋白的30%.重組蛋白經SDS-PAGE分離,染色切膠收集後,作為抗原免疫新西蘭傢兔,分離抗血清,經純化得到1:20 000效價的多剋隆抗體.Wescem blot結果顯示,該抗體能特異識彆在原覈錶達繫統內錶達的抗原,以及水稻根尖細胞質膜組分中的LRR型類受體蛋白激酶,併且在蛋白質水平證實該激酶為鹽脅迫響應蛋白.
전기연구표명,수도근첨세포질막류수체단백격매OsRLK적표체수염협박유도.위료진일보연구해격매적생리공능,통과반전록PCR득도OsRLK포외구cDNA편단,장기아극륭지pET29a원핵표체재체병재대장간균중실현료고표체,표체량약위세포총단백적30%.중조단백경SDS-PAGE분리,염색절효수집후,작위항원면역신서란가토,분리항혈청,경순화득도1:20 000효개적다극륭항체.Wescem blot결과현시,해항체능특이식별재원핵표체계통내표체적항원,이급수도근첨세포질막조분중적LRR형류수체단백격매,병차재단백질수평증실해격매위염협박향응단백.
