CAJ | 학술논문

目的了解小鼠耳蜗螺旋神经节细胞电压依赖性离子通道的特性。方法采用耳蜗螺旋神经节细胞与耳蜗基底膜整体培养和膜片钳全细胞记录方法。结果采用出生后0至5 d的C57BL/10J小鼠(n=30)，耳蜗螺旋神经节细胞与基底膜一道取出，培养8～48 h后，基底膜内侧和周围散落的螺旋神经节细胞贴壁良好，便于进行生理学记录。螺旋神经节细胞根据在电流钳记录下有无动作电位来鉴别，健康的细胞在刺激电流的起始端和结束端均可记录到动作电位。细胞平均静息电位(±s，下同)为(-55±5) mV(n=39)，平均动作电位幅度为(-61±11) mV(n=31)。用电压钳方法在Hank液中可记录到快速的TTX敏感型内向钠电流和TEA、4－AP敏感型外向持续性钾电流，平均电流幅度(±s，下同)分别为(-2.0±1.1) nA(n=39)和(3.0±1.3) nA(n=39)。在含有高浓度钡离子的细胞外液中，阻断钾电流和钠电流后，可记录到幅度为(-1.0±0.7) nA(n=20)的钙电流。部分细胞还记录到大约20次/s的自发性放电（n=4），放电幅度约为2 nA。结论新生小鼠（小于5 d）螺旋神经节细胞可随基底膜一道从耳蜗中分离培养。培养8～48 h后的螺旋神经节细胞活性良好，便于进行生理学记录。达到全细胞记录状态后，大部分细胞可记录到动作电位，电压依赖性钠电流、钾电流和钙电流，部分细胞还记录到自发性放电，放电频率达到活体记录的水平。
목적료해소서이와라선신경절세포전압의뢰성리자통도적특성。방법채용이와라선신경절세포여이와기저막정체배양화막편겸전세포기록방법。결과채용출생후0지5 d적C57BL/10J소서(n=30)，이와라선신경절세포여기저막일도취출，배양8～48 h후，기저막내측화주위산락적라선신경절세포첩벽량호，편우진행생이학기록。라선신경절세포근거재전류겸기록하유무동작전위래감별，건강적세포재자격전류적기시단화결속단균가기록도동작전위。세포평균정식전위(±s，하동)위(-55±5) mV(n=39)，평균동작전위폭도위(-61±11) mV(n=31)。용전압겸방법재Hank액중가기록도쾌속적TTX민감형내향납전류화TEA、4－AP민감형외향지속성갑전류，평균전류폭도(±s，하동)분별위(-2.0±1.1) nA(n=39)화(3.0±1.3) nA(n=39)。재함유고농도패리자적세포외액중，조단갑전류화납전류후，가기록도폭도위(-1.0±0.7) nA(n=20)적개전류。부분세포환기록도대약20차/s적자발성방전（n=4），방전폭도약위2 nA。결론신생소서（소우5 d）라선신경절세포가수기저막일도종이와중분리배양。배양8～48 h후적라선신경절세포활성량호，편우진행생이학기록。체도전세포기록상태후，대부분세포가기록도동작전위，전압의뢰성납전류、갑전류화개전류，부분세포환기록도자발성방전，방전빈솔체도활체기록적수평。