CAJ | 학술논문

从缢蛏(Sinonovacula constricta Lamarck) cDNA文库中筛选出一条热休克蛋白70(Heat shock protein 70,HSP70)同源序列,采用EST扩增和5′RACE(rapid amplification of cDNA ends,RACE)扩增方法获得全长cDNA序列,共2 335 bp,包括76 bp的5′非翻译区和309 bp的3′非翻译区,以及1 950 bp的开放阅读框.阅读框共编码649个氨基酸,推算的分子量约为70.89 kD,理论等电点为5.28.氨基酸序列分析结果表明,该基因的氨基酸序列含有HSP70家族的3个签名序列,2个糖基化位点,1个ATP-GTP结合位点,且C末端具有GGXP四肽重复序列以及细胞质特异性调控基序EEVD.该基因是组成型HSC70(Heat shock cognate 70)亚家族基因成员,被命名为ScHsc 70.基于氨基酸序列的双壳贝类聚类分析表明,缢蛏与南极帽贝(Laternula elliptica)、文蛤(Meretrix meretrix)的亲缘关系最近.荧光定量表达分析显示,ScHsc70 mRNA在缢蛏水管、鳃、斧足、外套膜、肝和性腺等组织中以不同水平存在,其中在外套膜中的表达量最低,而在水管和肝中的表达量最高.经副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)和副鳗弧菌(V.anguillarum)诱导后,ScHsc70 mRNA在缢蛏肝中的水平呈现先升高后下降的变化趋势,且分别在感染后的第20小时和第30小时达到最高.结果提示,缢蛏Sc Hsc 70基因可能参与了对细菌感染的防御反应.
종액정(Sinonovacula constricta Lamarck) cDNA문고중사선출일조열휴극단백70(Heat shock protein 70,HSP70)동원서렬,채용EST확증화5′RACE(rapid amplification of cDNA ends,RACE)확증방법획득전장cDNA서렬,공2 335 bp,포괄76 bp적5′비번역구화309 bp적3′비번역구,이급1 950 bp적개방열독광.열독광공편마649개안기산,추산적분자량약위70.89 kD,이론등전점위5.28.안기산서렬분석결과표명,해기인적안기산서렬함유HSP70가족적3개첨명서렬,2개당기화위점,1개ATP-GTP결합위점,차C말단구유GGXP사태중복서렬이급세포질특이성조공기서EEVD.해기인시조성형HSC70(Heat shock cognate 70)아가족기인성원,피명명위ScHsc 70.기우안기산서렬적쌍각패류취류분석표명,액정여남겁모패(Laternula elliptica)、문합(Meretrix meretrix)적친연관계최근.형광정량표체분석현시,ScHsc70 mRNA재액정수관、새、부족、외투막、간화성선등조직중이불동수평존재,기중재외투막중적표체량최저,이재수관화간중적표체량최고.경부용혈호균(Vibrio parahaemolyticus)화부만호균(V.anguillarum)유도후,ScHsc70 mRNA재액정간중적수평정현선승고후하강적변화추세,차분별재감염후적제20소시화제30소시체도최고.결과제시,액정Sc Hsc 70기인가능삼여료대세균감염적방어반응.