CAJ | 학술논문

目的:建立Tet-On调控系统和Cre/loxP基因剔除系统双重调控表达丙型肝炎病毒(HCV) NS3/4A丝氨酸蛋白酶三转基因小鼠.方法:选择适龄并经鉴定的在Tet-on系统调控下肝脏特异性表达Cre重组酶的双转基因小鼠Lap/LC-1与在Tet-on系统调控下肝脏特异性表达萤光素酶(Luc)的双转基因小鼠Lap/NS3/4A交配,子代小鼠经PCR检测、筛选基因组中NS3/4A、Lap、LC-I等3个转基因片段均阳性的小鼠.三阳性的NS3/4A/Lap/LC-1小鼠经多西环素( Dox)诱导1周后,以在体生物发光成像系统(BLI)检测报告基因Luc的表达,免疫组化检测小鼠体内Cre重组酶、HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶的表达状况.结果:NS3/4A/Lap/LC-1小鼠经Dox诱导后,BLI结果显示仅在小鼠肝脏部位有强烈的发光信号,表明这些小鼠肝细胞内报告基因Luc特异高效表达；免疫组化结果证实Cre重组酶、NS3/4A蛋白酶仅在经诱导后的小鼠肝细胞中特异性表达.结论:建立了Tet-On调控系统和Cre/loxP基因剔除系统双重调控下表达HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶的三转基因小鼠模型,为进一步研究HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶在HCV感染后与宿主相互作用的机制,以及抗NS3/4A丝氨酸蛋白酶特异性抑制剂的筛选奠定了基础.
목적:건립Tet-On조공계통화Cre/loxP기인척제계통쌍중조공표체병형간염병독(HCV) NS3/4A사안산단백매삼전기인소서.방법:선택괄령병경감정적재Tet-on계통조공하간장특이성표체Cre중조매적쌍전기인소서Lap/LC-1여재Tet-on계통조공하간장특이성표체형광소매(Luc)적쌍전기인소서Lap/NS3/4A교배,자대소서경PCR검측、사선기인조중NS3/4A、Lap、LC-I등3개전기인편단균양성적소서.삼양성적NS3/4A/Lap/LC-1소서경다서배소( Dox)유도1주후,이재체생물발광성상계통(BLI)검측보고기인Luc적표체,면역조화검측소서체내Cre중조매、HCV NS3/4A사안산단백매적표체상황.결과:NS3/4A/Lap/LC-1소서경Dox유도후,BLI결과현시부재소서간장부위유강렬적발광신호,표명저사소서간세포내보고기인Luc특이고효표체；면역조화결과증실Cre중조매、NS3/4A단백매부재경유도후적소서간세포중특이성표체.결론:건립료Tet-On조공계통화Cre/loxP기인척제계통쌍중조공하표체HCV NS3/4A사안산단백매적삼전기인소서모형,위진일보연구HCV NS3/4A사안산단백매재HCV감염후여숙주상호작용적궤제,이급항NS3/4A사안산단백매특이성억제제적사선전정료기출.