临床神经病学杂志
臨床神經病學雜誌
림상신경병학잡지
JOURNAL OF CLINICAL NEUROLOGY
2012年
3期
208-210
,共3页
金虹艳%赵长振%陈泽军%徐耑%孔岩
金虹豔%趙長振%陳澤軍%徐耑%孔巖
금홍염%조장진%진택군%서단%공암
1-甲基-4-苯基吡啶离子%哺乳动物雷帕霉素靶位%人神经母细胞瘤细胞株%自噬%帕金森病
1-甲基-4-苯基吡啶離子%哺乳動物雷帕黴素靶位%人神經母細胞瘤細胞株%自噬%帕金森病
1-갑기-4-분기필정리자%포유동물뢰파매소파위%인신경모세포류세포주%자서%파금삼병
目的 研究1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)对人骨髓神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y细胞哺乳动物雷帕霉素靶位(mTOR)信号通路相关蛋白表达的影响.方法 体外培养的SH-SY5Y细胞分为正常对照组、MPP+ 0.25 mmol/L组、0.5 mmol/L组及1 mmol/L组,各MPP+组细胞与含相应浓度的MPP-培养24 h.采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组细胞相对存活率；应用免疫印迹法检测各组细胞中mTOR蛋白、核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)、mTOR调控相关蛋白(Raptor)、雷帕霉素不敏感的mTOR伴侣蛋白(Rictor)以及与自噬相关的微管相关蛋白1轻链3(LC3Ⅱ)、Beclinl蛋白表达水平.结果 与正常对照组比较,各MPP+组细胞相对存活率显著降低(P＜0.05～0.001)；mTOR、p70S6K、Raptor、Rictor表达明显降低(P ＜0.05～0.001);LC3Ⅱ和Beclin1表达显著升高(P ＜0.05～0.001),均呈现出明显的量效关系.结论 MPP+通过抑制细胞中mTOR信号通路,诱导SH-SY5Y细胞自噬性死亡,并且与MPP+的浓度相关；这可能是MPP+导致PD动物模型发病的机制.
目的 研究1-甲基-4-苯基吡啶離子(MPP+)對人骨髓神經母細胞瘤細胞株SH-SY5Y細胞哺乳動物雷帕黴素靶位(mTOR)信號通路相關蛋白錶達的影響.方法 體外培養的SH-SY5Y細胞分為正常對照組、MPP+ 0.25 mmol/L組、0.5 mmol/L組及1 mmol/L組,各MPP+組細胞與含相應濃度的MPP-培養24 h.採用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測各組細胞相對存活率；應用免疫印跡法檢測各組細胞中mTOR蛋白、覈糖體蛋白S6激酶(p70S6K)、mTOR調控相關蛋白(Raptor)、雷帕黴素不敏感的mTOR伴侶蛋白(Rictor)以及與自噬相關的微管相關蛋白1輕鏈3(LC3Ⅱ)、Beclinl蛋白錶達水平.結果 與正常對照組比較,各MPP+組細胞相對存活率顯著降低(P＜0.05～0.001)；mTOR、p70S6K、Raptor、Rictor錶達明顯降低(P ＜0.05～0.001);LC3Ⅱ和Beclin1錶達顯著升高(P ＜0.05～0.001),均呈現齣明顯的量效關繫.結論 MPP+通過抑製細胞中mTOR信號通路,誘導SH-SY5Y細胞自噬性死亡,併且與MPP+的濃度相關；這可能是MPP+導緻PD動物模型髮病的機製.
목적 연구1-갑기-4-분기필정리자(MPP+)대인골수신경모세포류세포주SH-SY5Y세포포유동물뢰파매소파위(mTOR)신호통로상관단백표체적영향.방법 체외배양적SH-SY5Y세포분위정상대조조、MPP+ 0.25 mmol/L조、0.5 mmol/L조급1 mmol/L조,각MPP+조세포여함상응농도적MPP-배양24 h.채용사갑기우담서염(MTT)법검측각조세포상대존활솔；응용면역인적법검측각조세포중mTOR단백、핵당체단백S6격매(p70S6K)、mTOR조공상관단백(Raptor)、뢰파매소불민감적mTOR반려단백(Rictor)이급여자서상관적미관상관단백1경련3(LC3Ⅱ)、Beclinl단백표체수평.결과 여정상대조조비교,각MPP+조세포상대존활솔현저강저(P＜0.05～0.001)；mTOR、p70S6K、Raptor、Rictor표체명현강저(P ＜0.05～0.001);LC3Ⅱ화Beclin1표체현저승고(P ＜0.05～0.001),균정현출명현적량효관계.결론 MPP+통과억제세포중mTOR신호통로,유도SH-SY5Y세포자서성사망,병차여MPP+적농도상관；저가능시MPP+도치PD동물모형발병적궤제.
