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CHINESE JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY
2012年
6期
549-554
,共6页
宋子凤%张庆林%张养军%秦伟捷%钱小红
宋子鳳%張慶林%張養軍%秦偉捷%錢小紅
송자봉%장경림%장양군%진위첩%전소홍
原子转移自由基聚合反应%鳞片状聚合物修饰硅胶%制备%胰蛋白酶固定%蛋白质组学
原子轉移自由基聚閤反應%鱗片狀聚閤物脩飾硅膠%製備%胰蛋白酶固定%蛋白質組學
원자전이자유기취합반응%린편상취합물수식규효%제비%이단백매고정%단백질조학
利用原子转移自由基聚合法制备了鳞片状聚合物修饰的硅胶填料,将其作为一种新型的固定化酶载体,实现了蛋白酶的高密度固定,从而明显缩短了复杂蛋白质样品的酶解时间.使用标准蛋白质对固定化酶的酶解效率进行了考察,结果表明:鳞片状聚合物修饰的新型固定化酶硅胶填料具有较高的酶解效率,酶解标准蛋白质1 min 后,鉴定到肽段的氨基酸序列覆盖率可达95%以上.将该固定化酶硅胶填料成功应用于大肠杆菌全蛋白质的酶解,从2 min酶解肽段的混合物中鉴定到的蛋白质数量超过同样条件下溶液酶解12h的结果.另外,该固定化酶硅胶填料可以重复使用,其酶解效率具有良好的稳定性和重现性;该固定化酶具有较好的样品回收率,因而可以应用于蛋白质组学研究中.
利用原子轉移自由基聚閤法製備瞭鱗片狀聚閤物脩飾的硅膠填料,將其作為一種新型的固定化酶載體,實現瞭蛋白酶的高密度固定,從而明顯縮短瞭複雜蛋白質樣品的酶解時間.使用標準蛋白質對固定化酶的酶解效率進行瞭攷察,結果錶明:鱗片狀聚閤物脩飾的新型固定化酶硅膠填料具有較高的酶解效率,酶解標準蛋白質1 min 後,鑒定到肽段的氨基痠序列覆蓋率可達95%以上.將該固定化酶硅膠填料成功應用于大腸桿菌全蛋白質的酶解,從2 min酶解肽段的混閤物中鑒定到的蛋白質數量超過同樣條件下溶液酶解12h的結果.另外,該固定化酶硅膠填料可以重複使用,其酶解效率具有良好的穩定性和重現性;該固定化酶具有較好的樣品迴收率,因而可以應用于蛋白質組學研究中.
이용원자전이자유기취합법제비료린편상취합물수식적규효전료,장기작위일충신형적고정화매재체,실현료단백매적고밀도고정,종이명현축단료복잡단백질양품적매해시간.사용표준단백질대고정화매적매해효솔진행료고찰,결과표명:린편상취합물수식적신형고정화매규효전료구유교고적매해효솔,매해표준단백질1 min 후,감정도태단적안기산서렬복개솔가체95%이상.장해고정화매규효전료성공응용우대장간균전단백질적매해,종2 min매해태단적혼합물중감정도적단백질수량초과동양조건하용액매해12h적결과.령외,해고정화매규효전료가이중복사용,기매해효솔구유량호적은정성화중현성;해고정화매구유교호적양품회수솔,인이가이응용우단백질조학연구중.