中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2012年
8期
718-721
,共4页
杨慈清%石晓卫%胡阿珍%贾阳阳%郭志坤%林俊堂
楊慈清%石曉衛%鬍阿珍%賈暘暘%郭誌坤%林俊堂
양자청%석효위%호아진%가양양%곽지곤%림준당
鸡胚%胚胎发育%活体电转%纤维投射
鷄胚%胚胎髮育%活體電轉%纖維投射
계배%배태발육%활체전전%섬유투사
目的:探索鸡胚发育过程中,脊髓左右侧神经元经纤维之间的联系,为脊髓两侧神经纤维投射提供形态学基础;方法:采用鸡胚带壳开窗培养技术,待胚胎发育至第3天,通过活体电转基因,将pCAGGS-GFP质粒0.1~0.5 μl准确注射到脊柱,在电压18 V、每次脉冲60 ms,间隔100 ms,电脉冲6次的条件下进行定时定位活体电转基因,电转后6小时开始到10天,分别收集胚胎,甲醛固定冰冻切片,DAPI染细胞核观察组织形态结构变化.结果:电转后6小时便可以观察到GFP的表达,24小时后可以看到GFP标记细胞纤维的投射,3天可以清晰的观察到转入GFP一侧脊髓的运动神经元纤维束投射到另外一侧脊髓.结论:电转GFP成功标记运动神经元纤维在脊髓左右两侧的投射.
目的:探索鷄胚髮育過程中,脊髓左右側神經元經纖維之間的聯繫,為脊髓兩側神經纖維投射提供形態學基礎;方法:採用鷄胚帶殼開窗培養技術,待胚胎髮育至第3天,通過活體電轉基因,將pCAGGS-GFP質粒0.1~0.5 μl準確註射到脊柱,在電壓18 V、每次脈遲60 ms,間隔100 ms,電脈遲6次的條件下進行定時定位活體電轉基因,電轉後6小時開始到10天,分彆收集胚胎,甲醛固定冰凍切片,DAPI染細胞覈觀察組織形態結構變化.結果:電轉後6小時便可以觀察到GFP的錶達,24小時後可以看到GFP標記細胞纖維的投射,3天可以清晰的觀察到轉入GFP一側脊髓的運動神經元纖維束投射到另外一側脊髓.結論:電轉GFP成功標記運動神經元纖維在脊髓左右兩側的投射.
목적:탐색계배발육과정중,척수좌우측신경원경섬유지간적련계,위척수량측신경섬유투사제공형태학기출;방법:채용계배대각개창배양기술,대배태발육지제3천,통과활체전전기인,장pCAGGS-GFP질립0.1~0.5 μl준학주사도척주,재전압18 V、매차맥충60 ms,간격100 ms,전맥충6차적조건하진행정시정위활체전전기인,전전후6소시개시도10천,분별수집배태,갑철고정빙동절편,DAPI염세포핵관찰조직형태결구변화.결과:전전후6소시편가이관찰도GFP적표체,24소시후가이간도GFP표기세포섬유적투사,3천가이청석적관찰도전입GFP일측척수적운동신경원섬유속투사도령외일측척수.결론:전전GFP성공표기운동신경원섬유재척수좌우량측적투사.