CAJ | 학술논문

目的研究组织因子(TF)表达对阿霉素诱导人神经母细胞瘤细胞系SK-N-MC细胞凋亡的影响.方法以Western blotting法检测SK-N-MC细胞TF表达.分子生物学方法构建TFsiRNA-pSUPER表达载体,以脂质体介导进行基因转染.以水溶性四唑盐(WST)法检测阿霉素细胞毒性.以Western blotting法检测阿霉素诱导的caspase-3、多聚ADP核糖转移酶(PARP)的活化水平.以Hochest 33342染色,荧光显微镜下检测凋亡细胞.结果 ①SK-N-MC细胞高表达TF;②转染TF siRNA-pSUPER表达载体的SK-N-MC细胞,TF表达水平呈剂量依赖性降低;③转染TFsiRNA-pSUPER的SK-N-MC细胞及转染pSUPER质粒的对照细胞分别以不同浓度阿霉素处理24 h,前者与后者相比存活细胞数显著降低;④转染TFsiRNA-pSUPER的SK-N-MC细胞及转染pSUPER质粒的对照细胞分别以阿霉素处理4、8 h,可见前者较后者caspase-3、PARP活化增强;⑤转染TFsiRNA-pSUPER的SK-N-MC细胞与对照细胞相比,经阿霉素处理后的凋亡细胞数显著增多(P＜0.05).结论人神经母细胞瘤SK-N-MC细胞中TF异常高表达,以siRNA特异性下调TF表达后,可增强阿霉素细胞毒性及其诱导的肿瘤细胞凋亡.肿瘤细胞中TF的异常高表达可能参与阿霉素诱导凋亡的调控.
목적 연구조직인자(TF)표체대아매소유도인신경모세포류세포계SK-N-MC세포조망적영향.방법 이Western blotting법검측SK-N-MC세포TF표체.분자생물학방법구건TFsiRNA-pSUPER표체재체,이지질체개도진행기인전염.이수용성사서염(WST)법검측아매소세포독성.이Western blotting법검측아매소유도적caspase-3、다취ADP핵당전이매(PARP)적활화수평.이Hochest 33342염색,형광현미경하검측조망세포.결과 ①SK-N-MC세포고표체TF;②전염TF siRNA-pSUPER표체재체적SK-N-MC세포,TF표체수평정제량의뢰성강저;③전염TFsiRNA-pSUPER적SK-N-MC세포급전염pSUPER질립적대조세포분별이불동농도아매소처리24 h,전자여후자상비존활세포수현저강저;④전염TFsiRNA-pSUPER적SK-N-MC세포급전염pSUPER질립적대조세포분별이아매소처리4、8 h,가견전자교후자caspase-3、PARP활화증강;⑤전염TFsiRNA-pSUPER적SK-N-MC세포여대조세포상비,경아매소처리후적조망세포수현저증다(P＜0.05).결론 인신경모세포류SK-N-MC세포중TF이상고표체,이siRNA특이성하조TF표체후,가증강아매소세포독성급기유도적종류세포조망.종류세포중TF적이상고표체가능삼여아매소유도조망적조공.