中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2006年
3期
282-284,287
,共4页
李越希%陶开华%张锦海%潘明洁
李越希%陶開華%張錦海%潘明潔
리월희%도개화%장금해%반명길
弓形虫%P30蛋白%抗原表位%基因克隆
弓形蟲%P30蛋白%抗原錶位%基因剋隆
궁형충%P30단백%항원표위%기인극륭
目的构建表达P30蛋白抗原表位的重组质粒及工程菌,获得纯化的P30蛋白抗原表位,用于检测弓形虫特异性抗体.方法采用PCR技术,设计一对引物(P30P3、P30P4),从弓形虫基因组DNA中扩增出编码P30蛋白抗原表位的基因片段,与载体pET28a(+)连接,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导后进行SDS-PAGE分析.用离子交换纯化表达的P30抗原表位,用ELISA鉴定其抗原性.结果表达的P30蛋白抗原表位以包涵体形式存在,纯化的P30蛋白抗原表位片段有较好的抗原性,可用于检测弓形虫抗体.结论已成功构建了高表达P30蛋白的工程菌,为研制弓形虫抗体检测试剂或疫苗奠定了基础.
目的構建錶達P30蛋白抗原錶位的重組質粒及工程菌,穫得純化的P30蛋白抗原錶位,用于檢測弓形蟲特異性抗體.方法採用PCR技術,設計一對引物(P30P3、P30P4),從弓形蟲基因組DNA中擴增齣編碼P30蛋白抗原錶位的基因片段,與載體pET28a(+)連接,重組質粒轉化大腸桿菌BL21(DE3),經IPTG誘導後進行SDS-PAGE分析.用離子交換純化錶達的P30抗原錶位,用ELISA鑒定其抗原性.結果錶達的P30蛋白抗原錶位以包涵體形式存在,純化的P30蛋白抗原錶位片段有較好的抗原性,可用于檢測弓形蟲抗體.結論已成功構建瞭高錶達P30蛋白的工程菌,為研製弓形蟲抗體檢測試劑或疫苗奠定瞭基礎.
목적구건표체P30단백항원표위적중조질립급공정균,획득순화적P30단백항원표위,용우검측궁형충특이성항체.방법채용PCR기술,설계일대인물(P30P3、P30P4),종궁형충기인조DNA중확증출편마P30단백항원표위적기인편단,여재체pET28a(+)련접,중조질립전화대장간균BL21(DE3),경IPTG유도후진행SDS-PAGE분석.용리자교환순화표체적P30항원표위,용ELISA감정기항원성.결과표체적P30단백항원표위이포함체형식존재,순화적P30단백항원표위편단유교호적항원성,가용우검측궁형충항체.결론이성공구건료고표체P30단백적공정균,위연제궁형충항체검측시제혹역묘전정료기출.
