生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2007年
2期
352-357
,共6页
刘明学%尹长城%春雷%黄华樑
劉明學%尹長城%春雷%黃華樑
류명학%윤장성%춘뢰%황화량
次级淋巴组织趋化因子%基因克隆%表达%大肠杆菌
次級淋巴組織趨化因子%基因剋隆%錶達%大腸桿菌
차급림파조직추화인자%기인극륭%표체%대장간균
次级淋巴组织趋化因子(SLC)是通过搜索表达序列标签(EST)数据库克隆出来的一CC类趋化因子.以人SLC序列为蓝本,利用重叠PCR(SOE-PCR)的方法获得了适宜在大肠杆菌中表达的SLC基因,将此序列分别克隆至表达载体pTMF和pAIM中,转化大肠杆菌,诱导表达.Western Blotting鉴定结果表明目的蛋白以可溶蛋白和包涵体两种形式表达,两种形式的蛋白所占比例依培养和诱导条件的不同而变化.对两种形式的表达产物分别用Ni-NTA金属亲和层析和包涵体复性方法纯化,在实验中还对纯化条件进行了探索.对纯化蛋白的电泳结果显示:纯化样品的分子量比预期的分子量要大.
次級淋巴組織趨化因子(SLC)是通過搜索錶達序列標籤(EST)數據庫剋隆齣來的一CC類趨化因子.以人SLC序列為藍本,利用重疊PCR(SOE-PCR)的方法穫得瞭適宜在大腸桿菌中錶達的SLC基因,將此序列分彆剋隆至錶達載體pTMF和pAIM中,轉化大腸桿菌,誘導錶達.Western Blotting鑒定結果錶明目的蛋白以可溶蛋白和包涵體兩種形式錶達,兩種形式的蛋白所佔比例依培養和誘導條件的不同而變化.對兩種形式的錶達產物分彆用Ni-NTA金屬親和層析和包涵體複性方法純化,在實驗中還對純化條件進行瞭探索.對純化蛋白的電泳結果顯示:純化樣品的分子量比預期的分子量要大.
차급림파조직추화인자(SLC)시통과수색표체서렬표첨(EST)수거고극륭출래적일CC류추화인자.이인SLC서렬위람본,이용중첩PCR(SOE-PCR)적방법획득료괄의재대장간균중표체적SLC기인,장차서렬분별극륭지표체재체pTMF화pAIM중,전화대장간균,유도표체.Western Blotting감정결과표명목적단백이가용단백화포함체량충형식표체,량충형식적단백소점비례의배양화유도조건적불동이변화.대량충형식적표체산물분별용Ni-NTA금속친화층석화포함체복성방법순화,재실험중환대순화조건진행료탐색.대순화단백적전영결과현시:순화양품적분자량비예기적분자량요대.
